規(guī)格參數(shù)：
資源名稱  褐球固氮菌說明書
種屬: Azotobacter│chroococcum

提供形式: 凍干物

安全等級: 1

模式菌株: no

應(yīng)用領(lǐng)域: 細(xì)菌肥料

培養(yǎng)基: 0003

生長條件: 28℃

存儲條件: 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

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儀器設(shè)備與器具：
1 恒溫培養(yǎng)箱：36±1℃。
2 1000ml三角燒瓶、1ml、10ml移液管。
3 接種針。
4 顯微鏡。
5 超凈工作臺。
6 玻片、酒精燈、洗耳球、試管架。
7 天平：感量0.01g。
8 滅菌釜。
9 培養(yǎng)皿（直徑為90mm）、試管，經(jīng)121℃、30分鐘滅菌。
10試管夾、酒精燈、秒表、載玻片
培養(yǎng)方法：
培養(yǎng)基 乳酸菌培養(yǎng)基 Ⅱ：Lacto-casein peptone (乳酪蛋白胨) 10g Beef extract 10g Yeast extract (酵母膏) 5g Glucose (葡萄糖) 5g Tween (吐溫) 80 1g K2HPO4 2g Na-acetate (醋酸鈉) 5g Diamine citrate (檸檬酸二胺) 2g MgSO4.7H2O 0.2g MnSO4.H2O 0.05g Distilled water (蒸餾水) 1000m pH 6.5-6.8。121℃，15min。
傳代方法 ①凍干管：75%酒精擦拭管壁，后用砂輪在凍干管壁劃兩圈，掰斷，用200μL無菌水或培養(yǎng)基充分溶解，平板涂布，活化培養(yǎng)。 ②斜面：試管口用75%酒精擦拭后，火焰灼燒，后用無菌接種鏟切塊，挑取接入平板或斜面，培養(yǎng)。
生長條件 30℃，好氧
存儲條件 2-8℃冷藏
低溫存法：
①簡單保存法，產(chǎn)品僅用于科研將瓊脂斜面孢子培養(yǎng)物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養(yǎng)物置于4℃冰箱保存,保存時(shí)間不超過1～2個(gè)月，若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時(shí)間可達(dá)3～4個(gè)月；②液氮超低溫保存法，將生長穩(wěn)定期的細(xì)胞懸浮在10%甘油或其他低冰點(diǎn)液體中，密封于安瓿管內(nèi)，然后控制冷卻速度，使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時(shí)，即可置于-150～-196℃的液氮罐中保存。大多數(shù)微生物如病毒、噬菌體、多種細(xì)菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物，都可用此法長期保存。
基本概念：
(1)菌群：由多種細(xì)菌混合組成的相對穩(wěn)定的細(xì)菌群體，具有某些共同性狀。如大腸菌群包括大腸桿菌、產(chǎn)氣腸細(xì)菌及他們之間的過渡類型。
(2) 菌屬：菌種的上一級分類，通常性狀相近、親緣關(guān)系密切的若干菌種組成一個(gè)菌屬，如芽孢桿菌屬、葡萄球菌屬、乳桿菌屬等。
(3)是細(xì)菌基本的分類單位，通常指表型特征相似、親緣關(guān)系接近的一類細(xì)菌群體，與同屬內(nèi)其他種有著明顯差異；當(dāng)涉及到細(xì)菌保存時(shí)，菌種是指細(xì)菌的種子（用來長期保存）資源。
(4) 菌型：同一菌種的不同細(xì)菌，在某些方面存在較小差異的為同一菌型，通常一個(gè)菌種內(nèi)的細(xì)菌可以分為多種不同的菌型。
(5) 菌株：由一個(gè)獨(dú)立分離的單細(xì)胞系培養(yǎng)而成的純遺傳型群體及其一切后代，一種微生物的每一個(gè)不同來源的純培養(yǎng)物均可稱為該菌種的一個(gè)菌株。
大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基短小芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus pumilus

Primarker™小鼠子宮成纖維細(xì)胞鑒定試劑盒Vagococcus sp.拉丁屬名: Vagococcus sp.

大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基楊樹細(xì)盾霉用途: 植物病原物；用于該類群菌的系統(tǒng)學(xué)研究

OptiTDS™小鼠子宮成纖維細(xì)胞組織解離液假單胞菌拉丁屬名: Pseudomonas japonica

小鼠子宮成纖維細(xì)胞生長因子竹蓀屬拉丁屬名: Dictyophora sp.

大鼠肺動脈成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基球孢白僵菌用途: 鞘翅目天牛屬害蟲生物防治

大鼠氣管和支氣管上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基松生擬層孔菌拉丁屬名: Fomitopsis pinicola

大鼠肺大動脈內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基香菇7注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

小鼠子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基簡青霉拉丁屬名: Penicillium simplicissimum

小鼠子宮成纖維細(xì)胞組織處理緩沖液土生叢毛單胞菌拉丁屬名: Comamonas terrigena

大鼠肺大靜脈內(nèi)皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基暗產(chǎn)色鏈霉菌拉丁屬名: Streptomyces phaeochromogenes

小鼠卵巢上皮細(xì)胞生長因子扁菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

大鼠肺成纖維細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基靈芝屬注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

大鼠支氣管平滑肌細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基里亞氏須腹菌注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

小鼠卵巢上皮細(xì)胞組織處理緩沖液Pedobacter拉丁屬名: Pedobacter  koreensis

PrimaCell™小鼠子宮成纖維細(xì)胞試劑盒大腸埃希氏菌拉丁屬名: Escherichia  coli
PALCAM添加劑*1mg/支*10PALCAM Supplement

LPM瓊脂*250LPM Agar

Half –Fraser 培養(yǎng)基*250Half-Fraser Medium

Half –Fraser 添加劑*5ml*2Half-Fraser Supplement

改良緩沖蛋白胨水(MBP)*250Modified Buffered Peptone Water

EB增菌液*250EB Enrichment Broth

Fraser 培養(yǎng)基*250Fraser Medium
褐球固氮菌說明書RAPIDWESTERNBlottingKitRat-WT快讀western blotting試劑盒DRYICE-Fsigma

78-90-01,2-丙二胺;丙二胺;1,2-二基丙烷1,2-PropanediaMine

3，4-二羥基shēng huà shì jì容量：RT5克

4,4-二叔丁基-2,2-聯(lián) 98% 4 4'-DI-TqRT-BUTYL-2 2'-DIPYRIDYL 98 7914-19-3

2,9-二甲基-4,7-二本基-1,10-啰啉shēng huà shì jì容量：RT100克

2216E瓊脂shēng huà shì jì容量：100克

1121-31-92-巰基N-氧化物(+4℃)2-Pyridinethiol 1-oxide

氫鈉shēng huà shì jì容量：5克

對苯二甲酰 p-Phthaloyl chloride,≥99.0% 100-20-9 100G 通用試劑

吉馬酮 Germacrone (≥98%,HPLC) 6902-91-6 20MG 標(biāo)準(zhǔn)品
微生物培養(yǎng)方法：
1、平板劃線分離法：把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的，但平板劃線分離法不能對菌落計(jì)數(shù)，而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜，對平板的要求比較高，產(chǎn)品僅用于科研可參照以下步驟：
a、制備平板培養(yǎng)基將蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃，向蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3～5ml并混合均勻，然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿，輕輕搖動培養(yǎng)皿，使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部，待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g，放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中，振搖15～20min混合均勻，用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻，制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml，滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置，用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展，使之分布均勻。