商品屬性：

商品介紹：

測(cè)定意義

β-GAL(EC 3.2.1.23)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中，能夠催化β半乳糖苷化合物中β半乳糖苷鍵水解，此外還具有轉(zhuǎn)半乳糖苷的作用。β-GAL不僅可為植物的快速生長(zhǎng)釋放儲(chǔ)存的能量，還能在正常的多糖代謝、細(xì)胞壁組分代謝以及衰老時(shí)細(xì)胞壁降解過(guò)程中催化多糖、糖蛋白以及半乳糖脂末端半乳糖殘基的水解，釋放自由的半乳糖。

測(cè)定原理：

β-GAL分解對(duì)-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷生成對(duì)-硝基，后者在400nm有最大吸收峰，通過(guò)測(cè)定吸光值升高速率來(lái)計(jì)算β-GAL活性。

自備用品：

可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

四分子交聯(lián)體2抗體（四旋蛋白）Anti-IL3 Antibody人視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮*培養(yǎng)基品牌

TTC33蛋白抗體Anti-IL3 Antibody人臍靜脈內(nèi)皮*培養(yǎng)基品牌

四分子交聯(lián)體3抗體（四旋蛋白）Anti-IL3 Antibody大鼠滑膜*培養(yǎng)基說(shuō)明書

T白血病同源蛋白2抗體Anti-IL3 Antibody胎兒成纖維*培養(yǎng)基圖片

跨膜蛋白132A抗體Anti-IL3 Antibody小鼠支氣管成纖維*培養(yǎng)基圖片

四聚體多肽蛋白21B抗體Anti-IL32 Antibody大鼠大隱靜脈內(nèi)皮*培養(yǎng)基品牌

原肌球蛋白1抗體Anti-IL31 Antibody人腦靜脈血管平滑肌*培養(yǎng)基品牌

轉(zhuǎn)錄增強(qiáng)因子TEF3抗體Anti-IL33 Antibody人角膜上皮*培養(yǎng)基價(jià)格

β半乳糖苷酶（βGAL）可見分光光度法犬白介素8(IL-8/CXCL8)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

大鼠胰島素(INS)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

甘肽(GSH)免疫試劑盒*直銷

抗單核細(xì)胞抗體(AMA)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

雌三醇(E3)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

ICOS配體(ICOSLG)免疫試劑盒*直銷

抗弓形體(tox)抗體(IgM)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

輪狀病毒(RV)IgM 免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

硫酸乙酰肝素蛋白多糖2(HSPG2)免疫試劑盒*直銷

大鼠膜相關(guān)磷脂A2(PLA2G2A)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過(guò)高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。