【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買說明!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
100管/96樣 | 微量法 | GOY-01S6413 |
商品介紹
測(cè)定意義 氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物,其中包括MDA。通過檢測(cè)MDA的水平即可檢測(cè)脂質(zhì)氧化的水平。 測(cè)定原理: MDA與硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在532nm有最大吸收峰,進(jìn)行比色后可估測(cè)樣品中過氧化脂質(zhì)的含量;同時(shí)測(cè)定600nm下的吸光度,利用532nm與600nm下的吸光度的差值計(jì)算MDA的含量。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本:
取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行
勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。
【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本:
先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL
提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);
12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10
4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于 1,建議將試劑二用蒸餾水稀釋 7 倍后使用(10μL 試劑二原液+60μL蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?對(duì)照管的范圍是 0.4-1。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;
(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間 30min可以延長(zhǎng)到 40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般
將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋 10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。
煙堿型乙酰受體α6/AChRα6抗體Human ANGPTL6(Angiopoietin Like Protein 6) ELISA Kit甘鈣
煙堿型乙酰受體α9/AChRα9抗體Human Ang III(Angiotensin III) ELISA Kitα-倒捻子素 α-Mangostin
煙堿型乙酰受體δ/AChRδ抗體Human Anti-Surv(Anti-Survivin Antibody) ELISA Kit玉米蛋白
凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白8抗體Human ANKRD1(Ankyrin Repeat Domain 1) ELISA Kit乳香膠
凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體Human AP(Allopregnanolone) ELISA Kit人抗突觸前膜抗體(PsmAb)ELISA試劑盒,PsmAb ELISA kit
β衣被蛋白抗體Human AP17(Apelin 17) ELISA Kit人抗狂犬病抗體(anti-RV)ELISA試劑盒, anti-RV ELISA
半胱酸蛋白4/11抗體Human ATF-1(Activating Transcription Factor 1) ELISA Kit人艾柯病IgM(ECHO IgM)ELISA試劑盒,ECHO IgM ELISA
1號(hào)染色體開放閱讀框187抗體Human AP13(Apelin 13) ELISA Kit人載脂蛋白A5(apo-A5)ELISA試劑盒, apo-A5 ELISA
丙二醛(MDA)微量法檢測(cè)試劑盒Anti-FAS(Apo-a1/CD95)/Biotin 標(biāo)記兔抗人、大鼠、小鼠載脂蛋白A1抗體IgG綿羊肌腱蛋白X(TNX)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-Tn-C/FITC 熒光素標(biāo)記腱糖蛋白-C抗體IgG綿羊前膠原C端肽(PCP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-TNF- Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子-α抗體IgG綿羊抗存活素抗體(Anti-Surv)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-TNF-alpha/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子-α抗體IgG綿羊蛋白C(PROC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-TNF-alpha/ TNF- Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記鼠抗人腫瘤壞死因子-α單克隆抗體 IgG綿羊蛋白激C-δ1(PKCδ1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-TNF- Beta/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子-β抗體IgG綿羊端粒(TE)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-TNFAIP1/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗體IgG綿羊β血小板球蛋白/β血栓環(huán)蛋白(β-TG)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-TNFAIP3 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白3抗體IgG綿羊Bcl2樣蛋白11(Bcl2L11)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-TNFSF14/LIGHT/CD258/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子配體超家族成員14抗體IgG綿羊脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-TNFSF4/CD252/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子配體超家族成員4抗體IgG綿羊10kDa干擾素γ誘導(dǎo)蛋白(IP-10/CXCL10)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-TNFSF18/GITR Ligand/FITC 熒光素標(biāo)記腫瘤壞死因子配體超家族成員18抗體IgG綿羊癌抗雌激素藥物耐藥性因1(BCAR1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物標(biāo)記腫瘤壞死因子抗體IgG綿羊腦鈉素(BNP)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-TNF- Alpha /HRP 辣根過氧化物標(biāo)記鼠抗人腫瘤壞死因子-α單克隆抗體IgG綿羊白彈性蛋白(HLE)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-CD34/Biotin 標(biāo)記CD34抗體IgG綿羊葡萄糖變位(PGM)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
Anti-TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha /FITC 熒光素標(biāo)記DNA拓普西異構(gòu)Ⅱ抗體IgG綿羊SH2攜帶蛋白(SHC/SLP-76)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒
測(cè)定步驟:
1、 酶標(biāo)儀預(yù)熱30min以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至450nm。
2、 試劑三的稀釋:將試劑三用蒸餾水稀釋50倍,用多少配多少。(試劑三和蒸餾水1:49稀釋。
3、 工作液配制:在試劑一加入100μl試劑二,充分混勻。配好的試劑4℃避光可保存一周。(若一次性測(cè)定樣本較少,可按照實(shí)際用量將試劑一和試劑二按照20ml:0.1ml的比例混勻配制)
4、 將一瓶試劑四用5ml蒸餾水溶解(溶解后一周內(nèi)用完)。
5、 樣本測(cè)定(在96孔板中依次加入下列試劑)
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測(cè)定。






















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