購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研

培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產(chǎn)物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

 ICA 人胰島細胞抗體 規(guī)格： 48T/96T

 IAA 人胰島素自身抗體 規(guī)格： 48T/96T

 PI 人胰島素原 規(guī)格： 48T/96T

 IGFBP-4 人胰島素樣生長因子結合蛋白4 規(guī)格： 48T/96T

 IGFBP-3 人胰島素樣生長因子結合蛋白3 規(guī)格： 48T/96T

 IGFBP2 人胰島素樣生長因子結合蛋白2 規(guī)格： 48T/96T

 IGFBP-1 人胰島素樣生長因子結合蛋白1 規(guī)格： 48T/96T

 IGF-2R 人胰島素樣生長因子2受體 規(guī)格： 48T/96T

 IGF-2 人胰島素樣生長因子2 規(guī)格： 48T/96T

TB1 感受態(tài)細胞 100ul*10 IGF-1 人胰島素樣生長因子1 規(guī)格： 48T/96T

 ISR-β 人胰島素受體β 規(guī)格： 48T/96T

 INS 人胰島素 規(guī)格： 48T/96T

 IAPP 人胰島淀粉樣多肽 規(guī)格： 48T/96T

 TAP 人*原激活肽 規(guī)格： 48T/96T

 Try-Ⅱ 人*原Ⅱ 規(guī)格： 48T/96T

 trypsin 人* 規(guī)格： 48T/96T

 CPAF 人衣原體蛋白酶樣活性因子 規(guī)格： 48T/96T

 HbCO 人一氧化碳血紅蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 NOS 人一氧化氮合成酶 規(guī)格： 48T/96T

 FA 人* 規(guī)格： 48T/96T

 OLAb 人氧化低密度脂蛋白抗體 規(guī)格： 48T/96T

 OxLDL 人氧化低密度脂蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 elongin 人延伸蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 NADPH 人*腺嘌呤二核苷酸磷酸 規(guī)格： 48T/96T

 CIC 人循環(huán)免疫復合物 規(guī)格： 48T/96T

 PDGFsR-α 人血血小板衍生生長因子可溶性受體α 規(guī)格： 48T/96T

 PDGF-AB 人血血小板衍生生長因子AB 規(guī)格： 48T/96T

 PF-4/CXCL4 人血小板因子4 規(guī)格： 4

shēng huà shì jì 牛肉蛋白胨 容量： 2～8℃，避光 1克

shēng huà shì jì 牛津瓊脂基礎 容量： 500克

shēng huà shì jì 凝膠多糖 容量： 25克

shēng huà shì jì 檸嗪酸 容量： 2～8℃，避光 10克

shēng huà shì jì 檸檬酸鋅 容量： 25克

shēng huà shì jì 檸檬酸銅 容量： 25克

shēng huà shì jì 檸檬酸鐵銨 容量： 5克

shēng huà shì jì 檸檬酸鐵 容量： 100克

shēng huà shì jì 檸檬酸氫二銨 容量： 1克

shēng huà shì jì 檸檬酸鈉 容量： 25克

shēng huà shì jì 檸檬酸鎂 容量： 2～8℃ 1克

shēng huà shì jì 檸檬酸鋰 容量： 5克

shēng huà shì jì 檸檬酸鉀 容量： 250毫克

shēng huà shì jì 檸檬酸鈣 容量： 25克

shēng huà shì jì 檸檬酸銨 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 檸檬醛 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 鎳絲 容量： 25克

shēng huà shì jì 鎳片 容量： RT 10克

shēng huà shì jì 鎳粉 容量： 25克

shēng huà shì jì 鎳箔 容量： RT 10克

8T/96T

注意事項:

1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產(chǎn)物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據(jù)實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據(jù)實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。