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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質?；蜻B接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

 FⅡ 兔子*Ⅱ 規(guī)格： 48T/96T

 TR 兔子*受體 規(guī)格： 48T/96T

 BNP 兔子腦鈉素/腦鈉尿肽 規(guī)格： 48T/96T

 ES 兔子內皮抑素 規(guī)格： 48T/96T

 eNOS-3 兔子內皮型一氧化氮合成酶3 規(guī)格： 48T/96T

 ET-1 兔子內皮素1 規(guī)格： 48T/96T

 ET-1 兔子內皮素1 規(guī)格： 48T/96T

 IgM 兔子免疫球蛋白M 規(guī)格： 48T/96T

 IgG 兔子免疫球蛋白G 規(guī)格： 48T/96T

 IgE 兔子免疫球蛋白E 規(guī)格： 48T/96T

 IgA 兔子免疫球蛋白A 規(guī)格： 48T/96T

 Sam 兔子可溶性粘附分子 規(guī)格： 48T/96T

Rosetta 2(DE3) 感受態(tài)細胞 100ul*10 sVCAM-1 兔子可溶性血管細胞粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T

 sEPCR 兔子可溶性血管內皮細胞蛋白C受體 規(guī)格： 48T/96T

 sICAM-1 兔子可溶性細胞間粘附分子1 規(guī)格： 48T/96T

 sCD40L 兔子可溶性白細胞分化抗原40配體 規(guī)格： 48T/96T

 sP-selectin 兔子可溶性P選擇素 規(guī)格： 48T/96T

 sE-selectin 兔子可溶性E選擇素 規(guī)格： 48T/96T

 ANGA 兔子抗中性粒細胞顆?？贵w 規(guī)格： 48T/96T

 MIP-5 兔子巨噬細胞炎性蛋白5 規(guī)格： 48T/96T

 MIP-1α/CCL3 兔子巨噬細胞炎性蛋白1α 規(guī)格： 48T/96T

 Collagenase II 兔子膠原酶II 規(guī)格： 48T/96T

 Collagenase I 兔子膠原酶I 規(guī)格： 48T/96T

 bFGF 兔子堿性成纖維細胞生長因子 規(guī)格： 48T/96T

 T4 兔子甲狀腺素 規(guī)格： 48T/96T

 TIMP-1 兔子基質金屬蛋白酶抑制因子1

shēng huà shì jì 氧化鐠 容量： RT 10克

shēng huà shì jì 氧化釹 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 氧化鎂 容量： 100克

shēng huà shì jì 氧化鋁H 容量： 100克

shēng huà shì jì 氧化鋁G 容量： RT 250克

shēng huà shì jì 氧化鋁60GF425 容量： RT 10克

shēng huà shì jì 氧化鋁60G 容量： 1公斤 

shēng huà shì jì 氧化鋁 容量： 2～8℃ 10毫克

shēng huà shì jì 氧化鑭 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 氧化鈧 容量： RT，避光 10克

shēng huà shì jì 氧化金 容量： RT 500毫升

shēng huà shì jì 氧化鎵 容量： RT 10克

shēng huà shì jì 氧化鉿 容量： RT 5克

shēng huà shì jì 氧化鋯 容量： 10克

shēng huà shì jì 氧化鈣 容量： 500克

shēng huà shì jì 氧化釓 容量： 100克

shēng huà shì jì 氧化發(fā)酵試驗（OF）培養(yǎng)基 容量： 25克

shēng huà shì jì 氧化鉺 容量： 10克

shēng huà shì jì 氧化銩 容量： 2～8℃ 25毫克

shēng huà shì jì 氧化鏑 容量： 25克

shēng huà shì jì 氧化鉍 容量： RT，避光 25克

shēng huà shì jì 羊毛脂 容量： 100克

shēng huà shì jì 羊膽鹽 容量： RT 5克

規(guī)格： 48T/96T

注意事項:

1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質粒或連接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。