購買客戶請先與我司細胞銷售人員核實訂購的產(chǎn)品名稱、種屬、貨號、數(shù)量、協(xié)商細胞價格并預約發(fā)貨期與提取方式。向銷售人員索取細胞說明書并認真閱讀以方便你的實驗操作。產(chǎn)品僅用于科研
| 產(chǎn)品名稱 | ArcticExpress(DE3)pRARE2 感受態(tài)細胞 100ul*10 |
| 包裝 | 100ul*10 |
| 分類 | 克隆感受態(tài)細胞 |
培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
操作方法:
1. 從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的DNA(質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物)并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動會降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB),混勻后37℃,200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作,將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。
shēng huà shì jì 乳香膠 容量: RT 25克
shēng huà shì jì 乳糖酸 容量: RT 5克
shēng huà shì jì 乳糖肉湯培養(yǎng)基 容量: RT 100克
shēng huà shì jì 乳糖培養(yǎng)基 容量: RT 支
shēng huà shì jì 乳糖莫能霉素葡萄糖醛酸瓊脂 容量: 100毫升
shēng huà shì jì 乳糖-明膠培養(yǎng)基 容量: RT 10克
shēng huà shì jì 乳糖復發(fā)酵管培養(yǎng)基 容量: 2~8℃ 25毫升
shēng huà shì jì 乳糖發(fā)酵管培養(yǎng)基 容量: 5毫升
shēng huà shì jì 乳糖蛋白胨培養(yǎng)液 容量: 1米
shēng huà shì jì 乳糖蛋白胨半固體培養(yǎng)基 容量: 1米
shēng huà shì jì 乳糖膽鹽發(fā)酵管培養(yǎng)基 容量: 2~8℃ 1.5克
shēng huà shì jì * 容量: 100克
shēng huà shì jì 乳酸鋅 容量: 2~8℃ 25克
shēng huà shì jì 乳酸脫氫酶測試盒 容量: RT 500支/包
shēng huà shì jì 乳酸脫氫酶(兔?。?容量: 5克
shēng huà shì jì 乳酸鋰 容量: 2~8℃ 5克
shēng huà shì jì 乳酸菌液體培養(yǎng)基 容量: 100克
shēng huà shì jì 乳酸菌檢測計數(shù)顯色培養(yǎng)基 容量: RT 支
shēng huà shì jì 乳酸過氧化物酶 容量: 1克*
integrin β2/CD11+CD18 人β2整合素 規(guī)格: 48T/96T
BMG/β2-MG 人β2微球蛋白 規(guī)格: 48T/96T
β2-GP1 Ab IgM 人β2糖蛋白1抗體IgM 規(guī)格: 48T/96T
β2-GP1 Ab IgG 人β2糖蛋白1抗體IgG 規(guī)格: 48T/96T
β2-GP1 IgA/G/M 人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M 規(guī)格: 48T/96T
ArcticExpress(DE3)pRARE2 感受態(tài)細胞 100ul*10 β2-GP1 Ab IgA 人β2糖蛋白1抗體IgA 規(guī)格: 48T/96T
β2-GP 人β2糖蛋白 規(guī)格: 48T/96T
α-enolase 人α烯醇化酶 規(guī)格: 48T/96T
α-SYN 人α突觸核蛋白 規(guī)格: 48T/96T
α-La 人α乳清蛋白 規(guī)格: 48T/96T
αHBDH 人α羥基丁酸脫氫酶 規(guī)格: 48T/96T
α-glucosidase 人α葡萄糖苷酶 規(guī)格: 48T/96T
α-SMA 人α平滑肌肌動蛋白 規(guī)格: 48T/96T
α-EP 人α-內(nèi)*肽 規(guī)格: 48T/96T
α Actin 人α肌動蛋白 規(guī)格: 48T/96T
α-SCA 人α橫紋肌肌動蛋白 規(guī)格: 48T/96T
α-GST 人α*S轉(zhuǎn)移酶 規(guī)格: 48T/96T
α Manase 人α甘露糖苷酶 規(guī)格: 48T/96T
IFN-α 人α干擾素 規(guī)格: 48T/96T
5
注意事項:
1. 產(chǎn)品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化,插入冰中8分鐘內(nèi)加入目標DNA,不可在冰中放置時間過長,長時間存放會降低轉(zhuǎn)化效率。
2. 混入質(zhì)?;蜻B接產(chǎn)物時應(yīng)輕柔操作。
3. 轉(zhuǎn)化高濃度的質(zhì)?;蚋咝实倪B接產(chǎn)物可相應(yīng)減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟:
1.取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉(zhuǎn)化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據(jù)實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2.待感受態(tài)細胞融化后,向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA(根據(jù)實際情況加入適量的DNA,通常100 μl感受態(tài)細胞能夠被1 ng超螺旋質(zhì)粒DNA所飽和),用移液器輕輕吹打混勻,冰浴30分鐘。
3.42℃熱擊45秒,迅速將離心管轉(zhuǎn)移到冰浴中,冰上靜置2-3分鐘
4.每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基(不含抗生素),混勻后置于37℃搖床,150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
5.根據(jù)實驗需求,取適量已轉(zhuǎn)化的感受態(tài)細胞,加到含相應(yīng)抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上,用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開,將平板置于37℃直至液體被吸收,倒置培養(yǎng),37℃培養(yǎng)12-16小時。






































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