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培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現用現配，液氮儲存。
操作方法：
1. 從-80℃拿出，迅速插入冰中，5分鐘后待菌塊融化，加入目的DNA（質粒或連接產物）并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打)，冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰中并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基 (2YT或LB)，混勻后37℃，200 rpm復蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌，留取100 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。
5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。如果進行藍白斑篩選操作，將平板放37℃培養(yǎng)至少15小時。

 ACTN-3

 PIAS3 人STAT3蛋白抑制分子 規(guī)格： 48T/96T

 SHC/SLP-76 人SH2攜帶蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 S-100 人S100蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 S-100B 人S100B蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 P-Selectin/CD62P 人P選擇素 規(guī)格： 48T/96T

 P-cad 人P鈣黏蛋白/胎盤鈣黏蛋白 規(guī)格： 48T/96T

人preptin ELISA Kit，48T/96T 人preptin ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

人Podocin ELISA Kit，48T/96T 人Podocin ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 PL7 人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成酶 規(guī)格： 48T/96T

 PL12/AlaRS 人PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶 規(guī)格： 48T/96T

 P53 人P53 規(guī)格： 48T/96T

 OJ/IleRS 人OJ抗體 規(guī)格： 48T/96T

BL21 感受態(tài)細胞 100ul*10人N-乙?；?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*ELISA Kit，48T/96T 人N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-*ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

 NAG 人N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶 規(guī)格： 48T/96T

 N-Cad 人N鈣黏蛋白/神經鈣黏蛋白 規(guī)格： 48T/96T

 N-MID-OT 人N端中段骨鈣素 規(guī)格： 48T/96T

 NT-proBNP 人N端前腦鈉素 規(guī)格： 48T/96T

 NT-proBNP 人N端前腦鈉素 規(guī)格： 48T/96T

 NLR 人NOD樣受體 規(guī)格： 48T/96T

 NHE3 人Na+/H+交換體3 規(guī)格： 48T/96T

 PAL 人L苯*解氨酶 規(guī)格： 48T/96T

 Jo1/HRS 人Jo1抗體 規(guī)格： 48T/96T

 IRAP 人ICE蛋白酶激活因子 規(guī)格： 48T/96T

人H-ras ELISA Kit，48T/96T 人H-ras ELISA Kit，48T/96T 規(guī)格： 48T/96T

人H-ras ELISA Kit，48T/96T 人H-ras ELISA Kit，48T/96T

shēng huà shì jì *試劑盒(帶標準) 容量： RT 100支/盒

shēng huà shì jì *標準品 容量： RT 96支/盒

shēng huà shì jì *（蛋清） 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 溶壁酶 容量： 100克

shēng huà shì jì 日落黃 容量： 1毫升

shēng huà shì jì 刃天青 容量： 100克

shēng huà shì jì 壬烯基丁二酸酐 容量： 5毫升

shēng huà shì jì 壬酸 容量： 25克

shēng huà shì jì 壬二酸 容量： 100克

shēng huà shì jì 人重組胰島素 容量： 100克

shēng huà shì jì 人造沸石 容量： RT 25克

shēng huà shì jì 人血纖維蛋白原 容量： 100克

shēng huà shì jì 人血清白蛋白(組份五) 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 人型支原體快速培養(yǎng)基 容量： RT 支

shēng huà shì jì 人纖溶酶 容量： 5克

shēng huà shì jì 醛縮酶測試盒 容量： RT 100塊/箱

shēng huà shì jì 醛縮酶 容量： 1公斤

shēng huà shì jì 醛試劑 容量： 25克

shēng huà shì jì 全胃浸粉 容量： 25克

shēng huà shì jì 全胃蛋白胨 容量： 2～8℃，避光 25克

shēng huà shì jì 去氧膽酸鹽瓊脂 容量： 100克

shēng huà shì jì 去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽乳糖蔗糖瓊脂 容量： 25克

規(guī)格： 48T/96T

注意事項:
1. 產品僅用于科研感受態(tài)細胞在冰中緩慢融化，插入冰中8分鐘內加入目標DNA，不可在冰中放置時間過長，長時間存放會降低轉化效率。
2. 混入質?；蜻B接產物時應輕柔操作。
3. 轉化高濃度的質?；蚋咝实倪B接產物可相應減少Z終用于涂板的菌量。
操作步驟：
1．取感受態(tài)細胞置于冰浴中。一次轉化感受態(tài)細胞的建議用量為50-100可以根據實際情況分裝使用。以下實驗以50μl感受態(tài)細胞為例。
2．待感受態(tài)細胞融化后，向感受態(tài)細胞懸液中加入目的DNA（根據實際情況加入適量的DNA，通常100        μl感受態(tài)細胞能夠被1         ng超螺旋質粒DNA所飽和），用移液器輕輕吹打混勻，冰浴30分鐘。
3．42℃熱擊45秒，迅速將離心管轉移到冰浴中，冰上靜置2-3分鐘
4．每個離心管中加入450μl無菌的SOC或LB培養(yǎng)基（不含抗生素），混勻后置于37℃搖床，150rpm振蕩培養(yǎng)45分鐘使菌體復蘇
 5．根據實驗需求，取適量已轉化的感受態(tài)細胞，加到含相應抗生素的或LB固體瓊脂培養(yǎng)基上，用無菌的涂布棒將細胞均勻涂開，將平板置于37℃直至液體被吸收，倒置培養(yǎng)，37℃培養(yǎng)12-16小時。