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實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

1.研究的對象是活細胞

在實驗過程中，根據(jù)要求可始終保持細胞活力，并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況，包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件，可以根據(jù)實際需要進行人為的控制，同時，可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察，這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。

3.研究的樣本可以達到比較均一性

通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞，需要時，可采用克隆化等方法使細胞達到純化。

4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設(shè)備

記錄方式可采用攝影照片、縮時電影、電視等多種手段。

5.研究的范圍比較廣泛

應(yīng)用的學科領(lǐng)域較為寬廣，如細胞學、免疫學、腫瘤學、生物化學、遺傳學、分子生物學等；

適用的對象范圍廣，從低等動物到高等動物，一種動物的不同年齡階段以及不同組織，都可進行有針對性的研究。

6.研究的費用相對較經(jīng)濟

可提供大量、同一時期、重復性好的、生物學性狀相似的實驗對象。

大鼠 CKS1L 基因全長ORF克隆

大鼠 PSME1 基因全長ORF克隆

大鼠 H2AFZ 基因全長ORF克隆

大鼠 BTF3 基因全長ORF克隆

大鼠 AGTRAP 基因全長ORF克隆

大鼠 SARNP 基因全長ORF克隆

大鼠 ANAPC11 基因全長ORF克隆

大鼠 COX4I1 基因全長ORF克隆

大鼠 LOC100911902 基因全長ORF克隆

大鼠 GSTM2 基因全長ORF克隆

CFPAC-1 (胰腺癌細胞) 1.5mL 蛋白K溶液，10mg/mL Proteinase K Solution -20℃保存 1.25-80 ng/mL 鼻病毒(RV)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

50T 登革熱病毒Ⅲ、Ⅳ型分型PCR檢測試劑盒  低溫運輸，-20℃保存Andrade氏糖類肉湯進口、國產(chǎn)Andrade’s Carbohydrate Broth用于細菌的糖發(fā)酵試驗250

1g 石榴紅硫酸鹽 Fast Garnet GBC Salt 室溫避光保存 0.156-10 ng/mL ELISA Kit for Human HMG box-containing protein 1

1.5mL 非DNA清除劑 DNA Erasol 4℃保存

50T 鯉春病毒PCR檢測試劑盒   低溫運輸，-20℃保存 0.156-10 ng/mL 人雙特異性蛋白4(DUSP4)ELISA試劑盒

1瓶 B16F10株 B16F10 低溫運輸和保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1

250mL Anticoagulant CPDA-1 Solution（抗凝劑CPDA-1）  Anticoagulant CPDA-1 Solution  常溫保存 0.312-20 ng/ml 人質(zhì)半共軛Beta裂合(CCbL1)ELISA試劑盒

250mL Sodium Phosphate Buffer（鈉緩沖液）,0.5M,pH7.5  Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.5  常溫保存 0.312-20 ng/mL ELISA Kit for Human Prostaglandin E synthase

1瓶 PA319株 PA319 低溫運輸和保存 0.156-10 ng/mL 1型脊髓灰質(zhì)炎病毒(PV-1)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)

季銨鹽類中和劑管  9ml*20 0.312-20 ng/mL 人味覺感受器類型2組分38(T2R38) ELISA試劑盒

1 mg Indo-1，五銨鹽 Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存 7.8-500 ng/mL 人糖化血紅蛋白A1c(HbA1c)ELISA試劑盒

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經(jīng)過計數(shù)的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法；

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理；

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕；

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率；

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。