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商品介紹：

測(cè)定意義

蔗糖酶（EC 3.2.1.26）是碳水化合物消化吸收的關(guān)鍵酶之一，能夠水解蔗糖變成相應(yīng)的單糖而被機(jī)體吸收。

測(cè)定原理

本試劑盒采用3.5－二硝基水楊酸法測(cè)定蔗糖酶催化產(chǎn)生的還原糖的含量，由此可得出蔗糖酶水解速度。其原理是3.5－二硝基水楊酸與還原糖共熱被還原成棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內(nèi)還原糖的量和反應(yīng)液的顏色深度成正比。此法操作簡(jiǎn)便、迅速、雜質(zhì)干擾較小。

所需的儀器和用品

可見分光光度計(jì)、沸水浴、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。

實(shí)驗(yàn)方法學(xué)：

選擇抗凝的注意點(diǎn)：

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致，同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒，充分抗凝，防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多（1ml抗凝全血能分離出0.4～0.5ml血漿）;

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后，解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁，如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

Anti-Survivin/RBITC  紅色熒光素羅丹明標(biāo)記 Survivin 蛋白抗體(標(biāo)記抗體)

Anti-PTN/FITC  熒光素標(biāo)記多效生長(zhǎng)因子抗體IgG

Anti-PTP-1B/FITC  熒光素標(biāo)記PTP-1B蛋白抗體IgG

Anti-PTPRJ/CD148/DEP1/FITC  熒光素標(biāo)記CD148抗體IgG

Anti-CD150/SLAM/FITC  熒光素標(biāo)記CD150抗體IgG

Rabbit Anti-human sIgA/FITC  熒光素標(biāo)記兔抗人分泌型IgA抗體

Anti-Rabbit Anti--mouse IgA/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記兔抗小鼠IgA抗體

Anti-PTTG/FITC  熒光素標(biāo)記垂體腫瘤轉(zhuǎn)化基因抗體IgG

蔗糖酶可見分光光度法檢測(cè)試劑盒腺苷酸環(huán)化1(AC-1)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

牛免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒*直銷

胱天蛋白3(Casp-3)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

鞘氨醇(SPH)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

兔血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

豚鼠免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒現(xiàn)貨供應(yīng)

小鼠D2(VD2)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

豬彈性蛋白(ELN)免疫試劑盒進(jìn)口、組裝

骨織素(Ostn)免疫試劑盒進(jìn)口、分裝

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4.        每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7.       依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。