蠟樣芽孢桿菌平板計(jì)數(shù)法之樣品處理！

蠟樣芽孢桿菌平板計(jì)數(shù)法之樣品處理！

蠟樣芽孢桿菌（學(xué)名：Bacillus cereus），又稱仙人掌桿菌，是一種革蘭氏陽(yáng)性菌，β溶血性的桿狀細(xì)菌 。經(jīng)常在土壤和食物中被發(fā)現(xiàn)，有些菌株會(huì)引起食物中毒，例如"炒飯綜合癥"（Fried Rice Syndrome）；另外一些菌株則對(duì)其他動(dòng)物有益。蠟樣芽孢桿菌是兼性厭氧性。與其他芽孢桿菌相同，它會(huì)產(chǎn)生防御性的內(nèi)芽孢。它的致病因子包括*（cereolysin）和磷脂酶C（Phospholipase C）。 今天小編主要為大家介紹一下它的平板計(jì)數(shù)法樣品處理。

⒈樣品處理

冷凍樣品應(yīng)在45 ℃以下不超過(guò)15 min 或在2 ℃～5 ℃不超過(guò)18 h 解凍，

若不能及時(shí)檢驗(yàn)，應(yīng)放于-10℃ ~ -20℃保存；非冷凍而易腐的樣品應(yīng)盡可能及時(shí)檢驗(yàn)，若不能及時(shí)檢驗(yàn)，應(yīng)置于2 ℃～5 ℃冰箱保存，24 h 內(nèi)檢驗(yàn)。

⒉樣品制備

稱取樣品25 g，放入盛有225 mL PBS 或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)杯內(nèi)，用旋轉(zhuǎn)刀片式均質(zhì)器以8000 r/min～10000 r/min 均質(zhì)1 min～2 min，或放入盛有225 mLPBS 或生理鹽水的無(wú)菌均質(zhì)袋中，用拍擊式均質(zhì)器拍打1 min～2 min。若樣品為液態(tài)，吸取25 mL 樣品至盛有225 mL PBS 或生理鹽水的無(wú)菌錐形瓶(瓶?jī)?nèi)可預(yù)置適當(dāng)數(shù)量的無(wú)菌玻璃珠)中，振蕩混勻，作為1:10 的樣品勻液。

⒊樣品的稀釋

吸取上述1:10 的樣品勻液1 mL 加到裝有9 mL PBS 或生理鹽水的稀釋管中，充分混勻制成1:100 的樣品勻液。據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì)，按上述操作，依次制成十倍遞增系列稀釋樣品勻液。每遞增稀釋1 次，換用1 支1mL 無(wú)菌吸管或吸頭。

⒋樣品接種

根據(jù)對(duì)樣品污染狀況的估計(jì)，選擇2 個(gè)～3 個(gè)適宜稀釋度的樣品勻液（液體樣品可包括原液），以0.3 mL、0.3 mL、0.4 mL 接種量分別入三塊MYP 瓊脂平板，然后用無(wú)菌L 棒涂布整個(gè)平板，注意不要觸及平板邊緣。使用前，如MYP瓊脂平板表面有水珠，可放在25 ℃～50 ℃的培養(yǎng)箱里干燥，直到平板表面的水珠消失。

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