銅綠假單胞菌的產(chǎn)氨實驗與氧化酶試驗方法！

銅綠假單胞菌的產(chǎn)氨實驗與氧化酶試驗方法！

銅綠假單胞菌

⒈原理：銅綠假單胞菌產(chǎn)生一種脫酰胺酶，可使乙酰胺經(jīng)脫酰胺作用釋放氨，滴加納氏試劑（dianhuagong），氨（NH4+）在堿性條件下與dianhuagong作用，生成紅色的絡(luò)合物。

⒉操作：將純培養(yǎng)物接種到裝有乙酰胺肉湯的試管中，在36℃±1℃下培養(yǎng)20h～24h。然后向每支試管培養(yǎng)物加入1～2滴鈉氏試劑，檢查各試管的產(chǎn)氨情況，如表現(xiàn)出從深黃色到磚紅色的顏色變化，則為陽性結(jié)果，否則為陰性。

氧化酶

⒈原理：氧化酶（細(xì)胞色素氧化酶）是細(xì)胞色素呼吸酶系統(tǒng)的終呼吸酶。具有氧化酶的細(xì)菌，首先使*氧化，再由氧化型*使對苯二胺氧化，生成有色的醌類化合物。

⒉操作：取2～3滴新鮮配制的氧化酶試劑滴到放于平皿里的潔凈濾紙上。用鉑金絲接種環(huán)或玻璃棒，將適量的純種培養(yǎng)物涂布在預(yù)備好的濾紙上。在10秒內(nèi)顯深藍(lán)紫色的視為陽性反應(yīng)。也可以按照商品化氧化酶測試產(chǎn)品的說明書進(jìn)行該項測試。

產(chǎn)熒光素實驗（金氏B培養(yǎng)基）

⒈原理：蛋白胨提供氮源；磷酸鹽促進(jìn)熒光素的產(chǎn)生并抑制綠膿色素的產(chǎn)生；*為熒光素的產(chǎn)生提供必須的陽離子；瓊脂使培養(yǎng)基的凝固。

⒉操作：將上述呈紅褐色的且氧化酶反應(yīng)呈陽性的培養(yǎng)物接種于金氏B培養(yǎng)基上，于36℃±1℃恒溫箱培養(yǎng)24h～5d。每天需取出在紫外燈下檢查其是否產(chǎn)生熒光，將5d內(nèi)產(chǎn)生熒光的菌落記錄為陽性。

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