玻璃紙瓊脂平板透析培養(yǎng)法觀察放線菌形態(tài)！

玻璃紙瓊脂平板透析培養(yǎng)法觀察放線菌形態(tài)！

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/span>

用放線菌的玻璃紙培養(yǎng)物觀察放線菌的個(gè)體形態(tài)

二、實(shí)驗(yàn)原理

放線菌自然生長(zhǎng)的個(gè)體形態(tài)的觀察現(xiàn)多用玻璃紙瓊脂透析培養(yǎng)法。

玻璃紙具有半透膜特性，其透光性與載玻片基本相同，采用玻璃紙瓊脂平板透析培養(yǎng)，能使放線菌生長(zhǎng)在玻璃紙上，然后將長(zhǎng)菌的玻璃紙剪取小片，貼放在載玻片上，用顯微鏡鏡檢可見到放線菌自然生長(zhǎng)的個(gè)體形態(tài)。

采用插片培養(yǎng)法也能觀察放線菌的個(gè)體形態(tài)。

三、實(shí)驗(yàn)器材

1、活材料：培養(yǎng)5-7天的紫色直絲鏈霉菌（Streptomyces violaceorectus）的斜面菌種、吸水鏈霉菌5102（Streptomyces hygroscopicus var.Yingchengensis(5102)）斜面菌種。

2、培養(yǎng)基：高氏一號(hào)瓊脂培養(yǎng)基（見附錄一、10）

器材：無(wú)菌平皿、玻璃紙、 9ml無(wú)菌水若干支、酒精燈、火柴、接種環(huán)、鑷子、玻璃刮鏟、1ml無(wú)菌吸管、剪刀、載玻片、顯微鏡。

四、實(shí)驗(yàn)方法

（1）將玻璃紙剪成培養(yǎng)皿大小，用舊報(bào)紙隔層疊好后滅菌。

（2）將放線菌斜面菌種制成10—3的孢子懸液。

（3）將高氏一號(hào)瓊脂培養(yǎng)基熔化后在火焰旁倒入無(wú)菌培養(yǎng)皿內(nèi)，每皿倒15ml左右，待培養(yǎng)基凝固后，在無(wú)菌操作下用鑷子將無(wú)菌玻璃紙履蓋在瓊脂平板上即制成玻璃紙瓊脂平板培養(yǎng)基。

（4）分別用1ml無(wú)菌吸管取0.2ml吸水鏈霉菌（5102）孢子懸液，紫色直絲鏈霉菌孢子懸液分別滴加在兩個(gè)玻璃紙瓊脂平板培養(yǎng)基上，并用無(wú)菌玻璃刮鏟涂抹均勻。

（5）將接種的玻璃紙瓊脂平板置28—30℃下培養(yǎng)。

（6）在培養(yǎng)至3天，5天，7天時(shí)，從溫室中取出平皿。在無(wú)菌環(huán)境下。打開培養(yǎng)皿，用無(wú)菌鑷子將玻璃紙與培養(yǎng)基分離，用無(wú)菌剪刀取小片置于載玻片上用顯微鏡觀察。

五、實(shí)驗(yàn)作業(yè)

（1）繪出吸水鏈霉菌（5102）和紫色直絲鏈霉菌自然生長(zhǎng)的個(gè)體形態(tài)圖。

（2）為什么在培養(yǎng)基上放了玻璃紙后，放線菌仍能生長(zhǎng)？

附：插片培養(yǎng)法

放線菌的插片培養(yǎng)是將放線菌菌種制成孢子懸液后（濃度以10—2—10—3為好），取0.2ml放在適合放線菌生長(zhǎng)的平板培養(yǎng)基上，用玻璃刮鏟涂布均勻，然后將滅過(guò)菌的蓋玻片斜插入固體培養(yǎng)基中，置28—32℃下培養(yǎng)，3—5天后取出蓋玻片放在載玻片上鏡檢，可見放線菌的自然生長(zhǎng)的個(gè)體形態(tài)。

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