實驗室炭疽芽胞桿菌的檢驗方法！

實驗室炭疽芽胞桿菌的檢驗方法！

炭疽桿菌（Bacillus anthraci）屬于芽孢桿菌屬，是引起某些家畜、野獸和人類炭疽?。ㄈ诵蠊不迹┑牟≡?。發(fā)病率的是牛羊，豬也可發(fā)生，人常因屠宰、食用或與病死畜接觸而感染。炭疽桿菌對社會公共衛(wèi)生和經(jīng)濟發(fā)展的危害，迄今仍占相當(dāng)大的比重。由該菌引起的炭疽病幾乎遍及世界各地，四季均可發(fā)生。今天小編主要為大家介紹一下它的檢驗方法。

⒈標(biāo)本采集：皮膚炭疽取病灶分泌物;肺炭疽取痰液;腸炭疽取糞便或嘔吐物;炭疽腦膜炎取腦脊液;各型炭疽均可采取血液。

⒉檢驗方法及鑒定：炭疽桿菌的檢驗要特別注意芽孢型的實驗室感染。

1)直接鏡檢：將可疑材料涂片，1：1000的固定5分鐘，再行革蘭染色和莢膜染色。鏡檢發(fā)現(xiàn)有莢膜的革蘭陽性、兩端平截、竹節(jié)狀排列形成長鏈桿菌，可作初步報告。

2)分離培養(yǎng)：一般接種*，35℃培養(yǎng)18-24h后可觀察到較大、灰白色、邊緣不整齊和有輕微溶血的菌落。

3)鑒定

①串珠試驗：將待檢菌接種于含*0.05―0.5U/ml的培養(yǎng)基經(jīng)37℃培養(yǎng)6h后，炭疽桿菌可發(fā)生形態(tài)變化，顯微鏡下見大而均勻的圓球狀菌體呈成串樣排列，類炭疽桿菌及其他需氧菌無此現(xiàn)象。本試驗鑒別意義較大。

②噬菌體裂解試驗：

取用37℃、4-6h待檢肉湯培養(yǎng)物，涂布于普通瓊脂平板，將AP631炭疽噬菌體1滴，于平板*劃一直線，置37℃18h，出現(xiàn)噬菌斑或噬菌帶者為陽性，每份標(biāo)本應(yīng)作2-3個同樣的試驗，同時滴種肉湯液作陰性對照。

③重碳酸鹽生長毒力試驗：

將待檢菌接種于含0.5%NaHCO3和10%馬血清的瓊脂平板上，置10%CO2環(huán)境37℃24-48h，有毒株形成莢膜，菌落呈粘液型，無毒株不形成莢膜，呈粗糙型菌落。

④*抑制試驗：

將待檢菌分別接種于*5、10、100U/ml的普通瓊脂平板，37℃培養(yǎng)24h，炭疽芽胞桿菌一般在含5U/ml的*平板上仍能生長，在含10、100U/ml*的平板上受到抑制而不生長。

⑤植物凝集試驗：

炭疽桿菌菌體多糖是某些植物凝集素受體，用凝集素試驗檢測炭疽桿菌。常用的方法有熒光標(biāo)記試驗和酶聯(lián)凝集素吸附試驗。本試驗可與其他類炭疽芽胞桿菌相鑒別。

4)判斷標(biāo)準(zhǔn)：

革蘭陽性、兩端平整、竹節(jié)狀成雙或短鏈排列，有莢膜的粗大桿菌，或莢膜腫脹試驗陽性，串珠試驗陽性;重碳酸鹽毒力試驗出現(xiàn)粘液型菌落可作出診斷。

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