稱取5.0 g樣品于50 mL離心管中,加入濃度為1 μg/mL同位素內(nèi)標(biāo)-13C5溶液10 μL,加入12 mL 20 g/L三水溶液和2.5 mL乙腈,渦旋混勻30 s,超聲10 min,于8000 r/min離心5 min,上清液全部轉(zhuǎn)移至50 mL離心管中,再向樣品中加入10 mL 20 g/L三水溶液重復(fù)提取一次,合并兩次提取液,用三水溶液定容至25 mL,再準(zhǔn)確移取5 mL,用氨水調(diào)節(jié)pH至8.5(±0.1)待凈化(本實(shí)驗(yàn)是采用陰性樣本做基質(zhì)加標(biāo)實(shí)驗(yàn),故省略酶解步驟)。
二、SPE凈化(GL PBA, 100 mg/3 mL)
(1)活化:向PBA柱中依次加入3 mL乙腈,3 mL 0.25 mol/L乙酸銨緩沖液(pH=8.5)進(jìn)行活化。
(2)上樣和洗脫:取上述待凈化液過柱,控制流速不超過1 s/滴,然后用3 mL 0.25 mol/L乙酸銨緩沖液(pH=8.5)淋洗小柱,棄去全部流出液,抽干小柱,用2 mL 0.1 mol/L甲酸水溶液洗脫,抽干小柱,收集全部洗脫液。
(3)上機(jī):取上述洗脫液過0.22 μm PES水系濾膜,供上機(jī)分析。
三、標(biāo)曲配制
采用內(nèi)標(biāo)法定量,分別精密量取適量的標(biāo)準(zhǔn)溶液和同位素內(nèi)標(biāo)-13C5工作液,用0.1 mol/L甲酸水溶液配制成適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。
四、儀器條件
色譜條件
儀器:UPLC-MS/MS(Thermo Fisher TQS Endura)
色譜柱: HILIC,2.1 mm×100 mm,3 μm
流動(dòng)相:A:5 mmol/L乙酸銨溶液(含0.1%甲酸) B:乙腈
洗脫方式:梯度洗脫,見表1
表1 梯度洗脫程序

流速:0.4 mL/min
柱溫:30 ℃
進(jìn)樣量:2 μL
質(zhì)譜條件
離子源:HESI 電噴霧電壓:3500V
鞘氣壓力:40 arb 輔氣壓力:1 arb
離子傳輸管:300 ℃ 輔氣溫度:400 ℃
表2 組分名稱、保留時(shí)間及特征離子一覽表(*為定量離子)

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果
表3 添加水平為2.0 μg/kg動(dòng)物源性食品中加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

產(chǎn)品列表






























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