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上海百蕊生物科技有限公司
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酶標(biāo)記抗體法的染色步驟2011/12/16
(一)直接法(1)石蠟切片脫蠟至水,冰凍切片或細(xì)胞涂片經(jīng)丙酮固定10min,PBS洗3min×2次。(2)滴加0.3%Hz02甲醇液,室溫處理20min,PBS洗3min×3次(抑制內(nèi)源性過氧化物酶活性)。(3)0。l%*37~C消化20min或AR(只限于石蠟片),PBS洗3min×3次。(4)滴加1:(5~20)正常羊血清或牛血清20min(室溫或37℃),吸去多余血清,不洗。(5)適當(dāng)稀釋的酶標(biāo)記特異性抗體(一抗)孵育60min37℃,PBS洗3min×3次。(6)0.04%DAB+0.0
不同型號(hào)全自動(dòng)洗板機(jī)的性能特點(diǎn)2011/12/14
(一)WellwashPlus型全自動(dòng)多功能洗板機(jī)該型號(hào)設(shè)備為芬蘭Labsystem公司產(chǎn)品,其陛能特點(diǎn)概括起來具有操作自動(dòng)化,方法設(shè)定和儀器管理智能化,清洗對(duì)象廣泛化,吸液控制化等優(yōu)點(diǎn)。例如,在操作和方法設(shè)定上,所有的操作參數(shù)都可以通過編程的形式將方法輸入微電腦,zui多可以編輯和儲(chǔ)存40個(gè)清洗程序。調(diào)用方法時(shí),只需按執(zhí)行鍵即可完成全部洗滌操作。該設(shè)備可以針對(duì)U形、V形和平底板各類微滴板進(jìn)行清洗,還可以定義和保存10種類型的清洗程序,從而滿足對(duì)不同廠家所生產(chǎn)的不同類型的板進(jìn)行各種方式的清洗。在
斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定材料和方法2011/12/12
斑點(diǎn)酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定法(DoISA,DELISA)是以纖維素膜代替免疫酶固相載體法中常用的聚苯乙烯微量反應(yīng)板而建立的一種免疫檢驗(yàn)方法。DELISA不僅保留了常規(guī)ELISA的優(yōu)點(diǎn),而且還彌補(bǔ)了抗原或抗體對(duì)載體包被不牢等不足,所以具有敏感性高,特異性強(qiáng),被檢樣品用量少,節(jié)省材料,不需特殊儀器,結(jié)果判定簡(jiǎn)單易行和便于長(zhǎng)期保存等特點(diǎn)。因此,該法自問世以來,以其*的優(yōu)勢(shì),廣泛應(yīng)用于抗原抗體的檢測(cè)和雜交瘤細(xì)胞的篩選等。DELISA的基本原理與常規(guī)ELISA和免疫酶染色法基本相同,即將抗原或抗體首先吸附在纖維
微量移液器的專業(yè)檢測(cè)與校準(zhǔn)2011/12/09
移液器的工作量大,長(zhǎng)期使用,將會(huì)使彈簧彈力發(fā)生變形,加之本身是塑料,不耐摩擦,就會(huì)出現(xiàn)誤差。為了保證移液器傳遞液體量的準(zhǔn)確性,必須對(duì)移液器進(jìn)行定期校準(zhǔn)。為了更好地發(fā)揮該類計(jì)量?jī)x器的作用,對(duì)新購(gòu)進(jìn)的儀器要進(jìn)行校準(zhǔn)才能使用;對(duì)正在使用的計(jì)量?jī)x器,由于長(zhǎng)期使用會(huì)造成其示值于度量對(duì)象的誤差,這種誤差若不進(jìn)行控制,及時(shí)校正,必定會(huì)影響科研工作。因此,對(duì)使用的移液器要定期檢定、校正,并建立檔案,只有這樣才能使其在日常工作中更好地發(fā)揮作用。目前,在許多實(shí)驗(yàn)室條件下進(jìn)行的常規(guī)檢測(cè)并不能*取代專業(yè)的校準(zhǔn)工作,因?yàn)?
免疫酶組織化學(xué)技術(shù)2011/12/09
1.酶標(biāo)直接法和間接法Nakane(1966)將辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記在抗體免疫球蛋白分子上,創(chuàng)建了酶標(biāo)記免疫組化的直接法、間接法和橋法。2.PAP法Stemberger(1969)在酶橋法的基礎(chǔ)上,建立了非標(biāo)記抗體法,先將HRP免疫兔、羊或鼠,制成抗HRP抗體,再與HRP結(jié)合,制備成PAP復(fù)合物,其敏感性要比酶標(biāo)直接法、間接法高出許多倍,其背景染色也要優(yōu)于直接法和間接法。在此基礎(chǔ)上又出現(xiàn)了許多PAP法變型方法,如雙PAP法、ASPAPAP法、APAAP法等。3.ABC法20世紀(jì)60年代初
溶劑回收的應(yīng)用和重要意義2011/12/05
溶劑回收主要有:溶劑與水的分離,自由氣體中的溶劑回收等。溶劑與水的分離溶劑回收是抗生素生產(chǎn)工藝中的重要工序,抗生素提取、精制過程對(duì)溶媒質(zhì)量的主要要求是水分和色級(jí)。通常精餾方式除去溶媒中的水分,用蒸發(fā)的方式去除溶媒中的色、雜質(zhì)等,上述幾種溶媒脫水過程均屬于非均相恒沸精餾。來料利用塔底排污的廢熱預(yù)熱后,進(jìn)入塔上部,塔底直接蒸汽加熱。物料在塔底經(jīng)過一定數(shù)量的塔板分離,塔頂蒸發(fā)接近恒沸組成的溶媒水二元混合物,冷凝后在分相罐中分層,輕相采出,重相回流,塔頂排污溶媒含量接近零。自由混合氣體中的溶劑回收尾氣的
實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)箱的選購(gòu)要點(diǎn)2011/12/03
培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、免疫學(xué)、遺傳學(xué)、微生物、農(nóng)業(yè)科學(xué)、藥物學(xué)的研究和生產(chǎn),已經(jīng)成為上述領(lǐng)域?qū)嶒?yàn)室zui普遍使用的常規(guī)儀器之一,其通過在培養(yǎng)箱箱體內(nèi)模擬形成一個(gè)類似細(xì)胞/組織在生物體內(nèi)的生長(zhǎng)環(huán)境如恒定的酸堿度(pH值:7.2-7.4)、穩(wěn)定的溫度(37°C)、較高的相對(duì)濕度(95%),來對(duì)細(xì)胞/組織進(jìn)行體外培養(yǎng)的一種裝置。用戶對(duì)培養(yǎng)箱都有兩條zui基本的要求,一是要求培養(yǎng)箱能夠?qū)囟群蜐穸忍峁﹝ui穩(wěn)定的控制,以便于其研究工作的進(jìn)展;二是要求培養(yǎng)箱能夠?qū)ε囵B(yǎng)箱內(nèi)的微生物污染進(jìn)行有效的防范,并且能
阻抗測(cè)量血液凝固狀況的方法2011/12/01
血液凝固是一個(gè)復(fù)雜、動(dòng)態(tài)的生理過程,血液會(huì)在受傷的地方凝固并止血。在心臟搭橋手術(shù)中,血液會(huì)被轉(zhuǎn)移到患者體外負(fù)責(zé)維持心、肺功能的心肺機(jī)中。心肺機(jī)由灌注技術(shù)專家操縱,負(fù)責(zé)監(jiān)控正確的參數(shù),確保有效地利用抗凝血?jiǎng)苊饣颊叩难耗?。為此,在手術(shù)過程中需要使用肝磷脂這種抗凝血藥物,隨后又必須迅速進(jìn)行逆向操作,以防止失血過多1。為了保持凝血與流血之間的精密平衡,在手術(shù)期間,每隔30~60分鐘需要對(duì)患者的凝血時(shí)間進(jìn)行一次監(jiān)控,手術(shù)后還需要進(jìn)行多次監(jiān)控,直到患者的凝血時(shí)間恢復(fù)正常2。目前,通常在病房就可以采集
實(shí)驗(yàn)室常見的十個(gè)小故障處理方法2011/11/29
實(shí)驗(yàn)室中常常會(huì)遇到一些意想不到的“小麻煩”,如瓶塞粘固打不開,儀器上的污垢難以除去,分液時(shí)發(fā)生乳化現(xiàn)象等等。如能采取適當(dāng)方法或技巧加以處理,這些麻煩就會(huì)迎刃而解。1.打開粘固的玻璃磨口當(dāng)玻璃儀器的磨口部位因粘固而打不開時(shí),可采取以下幾種方法進(jìn)行處理。(1)敲擊用木器輕輕敲擊磨口部位的一方,使其因受震動(dòng)而逐漸松動(dòng)脫離。對(duì)于粘固著的試劑瓶、分液漏斗的磨口塞等,可將儀器的塞子與瓶口卡在實(shí)驗(yàn)臺(tái)或木桌的棱角處,再用木器沿與儀器軸線成約70°角的方向輕輕敲擊,同時(shí)間歇地旋轉(zhuǎn)儀器,如此反復(fù)操作幾次,一般便可打
微量移液器的使用方法2011/11/25
一、標(biāo)準(zhǔn)操作適用的液體:水、緩沖液、稀釋的鹽溶液和酸堿溶液。1)按到*檔,垂直進(jìn)入液面幾毫米。2)緩慢松開控制按鈕,否則液體進(jìn)入吸頭過速會(huì)導(dǎo)致液體倒吸人移液器內(nèi)部吸人體積減少。3)打出液體時(shí)貼壁并有一定角度,先按到*檔,稍微停頓1s后,待剩余液體聚集后,再按到第二檔將剩余液體全部壓出。二、黏稠或易揮發(fā)液體的移取在移取黏稠或易揮發(fā)的液體時(shí),很容易導(dǎo)致體積誤差較大。為了提高移液準(zhǔn)確性,建議采取以下方法:1)移液前先用液體預(yù)濕吸頭內(nèi)部,即反復(fù)吸打液體幾次使吸頭預(yù)濕,吸液或排出液體時(shí)多停留幾秒。尤其對(duì)于
微量加樣器(移液器)使用的一般原則2011/11/24
在免疫測(cè)定及其他生物醫(yī)學(xué)研究中,加樣器的使用離不開一次性的塑料吸頭,盡管一次性塑料吸頭的使用增加了實(shí)驗(yàn)費(fèi)用,但降低了實(shí)驗(yàn)技術(shù)人員接觸傳染性病原體及有害實(shí)驗(yàn)材料如放射性核素的可能性,并且避免了吸頭多次重復(fù)使用所必需的清潔過程和腐蝕性去垢劑的使用。此外,在有些應(yīng)用上,如PCR測(cè)定中,吸頭必須是一次性的,以避免潛在污染發(fā)生的可能性。加樣器根據(jù)使用的要求,也在不斷發(fā)展。如可整體高壓滅菌加樣器的出現(xiàn)。使用UV線穩(wěn)定的塑料制作加樣器對(duì)于加樣器在許多方面的應(yīng)用非常重要,使得在實(shí)際工作中,在超凈臺(tái)或抽風(fēng)柜的紫外
全自動(dòng)洗板機(jī)的結(jié)構(gòu)及性能2011/11/22
自動(dòng)洗板機(jī)主要由機(jī)殼、清洗頭升降單元、微滴板驅(qū)動(dòng)單元、壓力和真空單元、開/關(guān)電源、微處理器及外設(shè)等幾大部分組成。(一)清洗頭升降單元主要由清洗頭、螺母、絲桿和升降電機(jī)等組成。在清洗頭上,注射管和吸液管為同軸,注射管在吸液管的內(nèi)部,這樣可以在同一位置實(shí)現(xiàn)吸液—注液—吸液的洗滌步驟,提高工作效率(有的洗板機(jī)注射管位于吸液管上部,前者比后者短,如奧地利的SLT智能化洗板機(jī))。由于U形底、V形底和平底等不同形狀的微滴板的沖洗高度不同,因此要求清洗頭沖洗位置的高度能自動(dòng)地進(jìn)行調(diào)整。螺旋轉(zhuǎn)動(dòng)機(jī)構(gòu)可以利用絲桿
直讀光譜儀相關(guān)介紹2011/11/19
直讀光譜儀,適合于戶外名種應(yīng)用,不管是用于壓力容器內(nèi)部分析、管道原位分析還是工場(chǎng)分析都沒有任何問題。因?yàn)樗敲芊庠谝粋€(gè)溫度穩(wěn)定的恒溫機(jī)箱里,設(shè)備的般運(yùn)和操作只要一個(gè)人就能完成。該光譜儀設(shè)計(jì)達(dá)到zui高的分析精度,新的雙光譜室能應(yīng)用的譜線,36個(gè)測(cè)量信道使這臺(tái)儀器能分析Fe、Ni、Cu、A1、Ti等多種基體。該光譜儀裝備了超高靈敏度的光電倍增管,在全量程范圍內(nèi)使檢測(cè)器的動(dòng)態(tài)范圍能鑒別出成分的zui微小的差別。曲面的第二個(gè)窄縫能清楚地分離出相鄰的譜線,這一點(diǎn)對(duì)包括高含量的合金成分分析在內(nèi)進(jìn)行高精度分
電位滴定儀的特點(diǎn)說明2011/11/17
電位滴定儀主要用于高等院校、科研機(jī)構(gòu)、石油化工、制藥、藥檢、冶金等各行業(yè)的各種成分的化學(xué)分析。電位滴定法是在滴定過程中通過測(cè)量電位變化以確定滴定終點(diǎn)的方法,和直接電位法相比,電位滴定法不需要準(zhǔn)確的測(cè)量電極電位值,因此,溫度、液體接界電位的影響并不重要,其準(zhǔn)確度優(yōu)于直接電拉法,普通滴定法是依靠指示劑顏色變化來指示滴定終點(diǎn),如果待測(cè)溶液有顏色或渾濁時(shí),終點(diǎn)的指示就比較困難,或者根本找不到合適的指示劑。電位滴定法是靠電極電位的突躍來指示滴定終點(diǎn)。在滴定到達(dá)終點(diǎn)前后,滴液中的待測(cè)離子濃度往往連續(xù)變化n個(gè)
微量加樣器(移液器)的具體操作方法2011/11/16
(一)設(shè)定容量值PipetmanP加樣器容量計(jì)讀數(shù)由三位數(shù)字組成(顯示所轉(zhuǎn)移液體容量),讀數(shù)到個(gè)位數(shù)。EppendorfResearch加樣器容量計(jì)讀數(shù)則由四位數(shù)字組成,讀數(shù)到小數(shù)后一位,從上(zui大有效數(shù)字)到下(zui小有效數(shù)字)讀取。利用底部刻度可將容量調(diào)節(jié)到更的分度。PipetmanP根據(jù)型號(hào)不同,數(shù)字可能是黑色或紅色的。EppendorfResearch加樣器的數(shù)字不同型號(hào)均為白色。轉(zhuǎn)動(dòng)加樣器的黑色調(diào)節(jié)環(huán)或按鈕的白色調(diào)節(jié)旋鈕均可設(shè)定容量。用白色調(diào)節(jié)旋鈕設(shè)定容量比較方便和快速,尤其是穿
酶聯(lián)免疫技術(shù)與酶標(biāo)儀的發(fā)展2011/11/11
(一)試劑微量化由于樣品檢測(cè)過程中有時(shí)需要對(duì)僅有的少量樣品進(jìn)行檢測(cè),而且由于檢測(cè)樣本數(shù)量大,因而要求進(jìn)行微量檢測(cè),從而能夠達(dá)到節(jié)約樣品、試劑的目的。進(jìn)行微量檢測(cè)對(duì)于儀器的靈敏度的要求大大提高,因此一些更加靈敏的檢測(cè)方法和新技術(shù)就被運(yùn)用到酶標(biāo)儀中,從而提高丁儀器的靈敏度,克服了檢測(cè)過程中樣品、試劑有限的問題。(二)檢測(cè)能力大大提高由于酶標(biāo)儀在醫(yī)院中使用較多,檢測(cè)任務(wù)重,需要同時(shí)檢測(cè)大量樣本,這就要求酶標(biāo)儀有足夠的檢測(cè)能力。這主要表現(xiàn)在微孔板上微孔數(shù)量的多少,從以前的48孔到目前zui常見的96孔板
全自動(dòng)洗板機(jī)的應(yīng)用與發(fā)展2011/11/09
自動(dòng)洗板機(jī)應(yīng)用廣泛,凡是具有酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)(ELISA)的酶反應(yīng)板皆可使用。應(yīng)用范圍包括:腫瘤標(biāo)記物的檢測(cè)、傳染性疾病的檢查及體檢(如肝炎10項(xiàng))、人類免疫缺陷病毒(HIV)抗體的檢測(cè)、梅毒血清反應(yīng)素試驗(yàn)、沙眼衣原體感染的血清學(xué)檢查和TORCH感染的血清學(xué)檢查等。應(yīng)用ELISA完成這些方面的檢測(cè)后,采用*的全自動(dòng)洗板機(jī)進(jìn)行洗板,以保證測(cè)試的準(zhǔn)確性和提高實(shí)驗(yàn)的可靠性。自動(dòng)洗板機(jī)是醫(yī)療科研單位進(jìn)行酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)時(shí),檢測(cè)各種感染性病毒所*的設(shè)備之一,其作用是通過清洗,實(shí)現(xiàn)酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)過程中結(jié)合相與游離
平板菌落計(jì)數(shù)介紹2011/11/07
平板菌落計(jì)數(shù)介紹實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備(培養(yǎng)基和試劑)平板計(jì)數(shù)瓊脂、75%乙醇、磷酸鹽緩沖稀釋液操作步驟1.樣品制備1)以無菌操作取有代表性的樣品盛于滅菌容器內(nèi)。如有包裝,則用75%乙醇在包裝開口處擦拭后取樣。2)制備樣品勻液:以無菌操作取25g樣品,放入裝有225ml稀釋劑的滅菌均質(zhì)杯內(nèi),于8000r/min均質(zhì)1-2min,制成1:10的樣品勻液。如樣品均質(zhì)時(shí)間超過2min,應(yīng)在均質(zhì)杯外加冰水冷卻。3)稀釋樣品勻液:用10ml滅菌吸管準(zhǔn)確吸取1:10的樣品勻液10ml,放入裝有90ml稀釋劑的150ml稀
做好實(shí)驗(yàn)室設(shè)備管理系統(tǒng)的方法介紹2011/11/04
一、儀器、設(shè)備管理制度1.本制度的目的在于規(guī)范中心實(shí)驗(yàn)室儀器設(shè)備的使用和維護(hù)的方式及措施,以確保發(fā)揮儀器設(shè)備的效益以及實(shí)驗(yàn)室的正常運(yùn)轉(zhuǎn)。2.本制度的適用范圍為涉及實(shí)驗(yàn)室擁有的所有儀器和設(shè)備的使用、管理、維護(hù)的管理行為。3.在發(fā)生本制度沒有明確,而涉及儀器、設(shè)備的所有行為時(shí),解釋、執(zhí)行權(quán)在實(shí)驗(yàn)室。4.為保證大型儀器設(shè)備的完好率和充分發(fā)揮效能,應(yīng)統(tǒng)一管理集中使用。5.實(shí)驗(yàn)室儀器、設(shè)備逐步對(duì)學(xué)院內(nèi)教師、研究生開放。6.認(rèn)真貫徹執(zhí)行國(guó)家計(jì)量法的有關(guān)規(guī)定,對(duì)使用的儀器設(shè)備應(yīng)定期檢定。7.各種儀器設(shè)備必須建
蒸發(fā)光散射檢測(cè)器基本信息說明2011/11/02
蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(EvaporativeLight-scatteringDetector)是通用型檢測(cè)器,可以檢測(cè)沒有紫外吸收的有機(jī)物質(zhì),如人參皂苷、黃芪甲苷等。蒸發(fā)光散射檢測(cè)器(EvaportivelightScatteringDetector,ELSD)的通用檢測(cè)方法消除了常見于傳統(tǒng)HPLC檢測(cè)方法中的難點(diǎn),不同于紫外和熒光檢測(cè)器,ELSD的響應(yīng)不依賴與樣品的光學(xué)特性,任何揮發(fā)性低于流動(dòng)相的樣品均能被檢測(cè),不受其官能團(tuán)的影響。ELSD的響應(yīng)值與樣品的質(zhì)量成正比,因而能用于測(cè)定樣品的純度或者檢
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