骨骼肌細胞純化的具體辦法

時間：2020/2/25閱讀：241

骨骼肌細胞的貼壁速度比非肌源性細胞慢，為此，可以用差速貼壁法取得較高純度的肌源性細胞。具體辦法是：

1．取原代培育早期的細胞(培育30~40h)，經(jīng)洗刷后，用0．25%的胰蛋白酶溶液消化。細胞開端脫壁時以馬血清停止消化。

2．搜集脫壁的細胞，洗刷后用培育液制備成細胞懸液。

3．當(dāng)即接種到另一培育板上，貼壁40min。此時，大都非肌源性細胞現(xiàn)已貼壁，而骨骼肌細胞仍懸浮在培育液中，或沉降到培育板上但未貼壁。

4．吸出未貼壁細胞，計數(shù)后將細胞調(diào)至所需細胞濃度，進行接種。

5．接種后，骨骼肌細胞純度可到達90％以上。該辦法亦可用于直接經(jīng)胰蛋白酶溶液消化的肌肉組織細胞。

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