影響ELISA試劑盒曲線問題的原因有哪些？

時間：2021/5/28閱讀：456

標準曲線做的好與壞會直接影響到實驗的結(jié)果，甚至是關(guān)系到實驗的成敗。我司技術(shù)人員在處理售后的問題中，有不少科研朋友咨詢曲線的問題，隨后我司技術(shù)人員將影響ELISA試劑盒曲線問題的原因做了如下總結(jié)：

一、OD值不正常的可能原因是：

1、試劑盒未回溫，試劑盒回溫到25℃；

2、溫度控制不好，控制正確溫度；

3、孵育時間不準確，控制孵育時間；

4、洗滌時沖擊力太大、浸泡時間過長、洗滌次數(shù)增加，洗滌4-5次，每孔250ul，然后拍干；

5、陽光直射，對著風直接吹，避風避；

6、酶標儀的波長錯誤，酶標儀的波長450nm；

7、抗體的稀釋錯誤，正確的稀釋抗體；

8、水質(zhì)問題，用娃哈哈礦泉水代替。

二、白板的可能原因是：

1、洗滌液配制錯誤，正確的配制洗滌液；

2、少加液體（錯加液體），正確的步驟加液體。

三、無梯度可能原因是：

1、標準品也污染，換標準品點板；

2、OD值不正常，控制溫度時間在做一次；

3、人為點板，不要點板。

四線性不好可能原因是：

OD值不正常，控制溫度時間在做一次。

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