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熒光素標(biāo)記抗體鑒定:
1、抗體的效價(jià)鑒定:鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng),瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn),酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來(lái)鑒定。
2、抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在IC50時(shí)的濃度,并按公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。
3、真核翻譯起始因子2C2抗體的親和力:是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小,抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵,疏水鍵,側(cè)鏈相反電荷基因的庫(kù)侖力,范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示,K的單位是L/mol。
熒光素標(biāo)記抗體應(yīng)用范圍:
1.用于細(xì)菌、病毒、梅毒螺旋體、鉤端螺旋體等微生物的抗原或抗體檢查。
2.用于臨床自身免疫病的多種自身抗體熒光檢查,如抗核抗體,抗心肌抗體等。
3.細(xì)胞因子等檢查的熒光流式細(xì)胞儀測(cè)定。
4.白細(xì)胞分型抗原的免疫熒光染色。
5.免疫組織及免疫病理中抗原,抗體檢查,如各種腫瘤抗原檢查。
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