Bsu DNA聚合酶 大片段

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Bsu DNA 聚合酶，來(lái)源于 嗜熱脂肪芽孢桿菌（Bacillus subtilis），系將 Bacillus subtilis DNA 聚合酶（Bsu） I 基因的前 296 個(gè) AA 截去而得。該酶保留了Bsu I 的 5′-3′聚合酶活性，但是缺失了 5′-3′ 核酸外切酶結(jié)構(gòu)域，該大片段自身缺失 3′-5′ 核酸外切酶活性，可用于重組酶擴(kuò)增。

應(yīng)用： 隨機(jī)引物法標(biāo)記
cDNA 第二條鏈的合成
單個(gè) dA 的加尾
鏈置換的 DNA 合成
熱失活：75°C，20min。
活性定義：在 37℃條件下，30min 內(nèi)參入 10nmol 酸性不容物定義為 1 Unit。
1X Bsu Reaction Buffer: 50 mM NaCl ，10 mM Tris-HCl(Ph7.5) , 10 mM MgCl2 , 1 mM DTT
酶儲(chǔ)存液：50 mM Tris-HCl (pH 8.0), 50 mM KCl, 1 mMDTT, 37.5% Glycerol.
儲(chǔ)存：置于-20°C 可保存 2 年，避免反復(fù)凍融。
注意：(1) 由于缺乏 3 ′-5 ′核酸外切酶活性，Bsu DNA 聚合酶不能切除 3′未配對(duì)的突出末端，因而不適用于生成平齊末端。
(2) 25℃ 時(shí) Bsu DNA 聚合酶保留 50% 的活性，是同溫度下 Klenow 片段（3′-5′ exo-）的兩倍。

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