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初級(jí)會(huì)員 | 第9年

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細(xì)胞凍存的步驟

時(shí)間：2022/4/19閱讀：1447
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細(xì)胞凍存的步驟：

1、冷凍前一日前更換半量或全量培養(yǎng)基，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情形。

2、使用ScienCell凍存液（貨號(hào)：0133）混合均勻，置于室溫下待用。

3、依細(xì)胞傳代培養(yǎng)的操作，收集培養(yǎng)好的細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0.1 ml) 計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

4、離心，去除上清液，加入適量冷凍保存溶液，使細(xì)胞濃度為1-5 x 10^6 cells/ml，混合均勻，

分裝于已標(biāo)示*之冷凍保存管中，1 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。

5、冷凍保存方法1: 冷凍管置于4 度10 分鐘→ -20 度 30 分鐘→ -80 度16～18 小時(shí)(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。

6、冷凍保存方法2: 冷凍管置于已設(shè)定程序之等速降溫機(jī)中，再放入液氮槽中。

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