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新型的蛋白連接酶對活細(xì)菌表面特定膜蛋白多種修飾

時間:2018-8-21閱讀:445
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IL-11elisa試劑盒細(xì)胞表面(cell surface)是指包圍在細(xì)胞質(zhì)外層的復(fù)合結(jié)構(gòu)體系,是細(xì)胞與外界環(huán)境物質(zhì)相互作用并產(chǎn)生各種復(fù)雜功能的部位。近年來,為了更好地了解細(xì)胞表面在細(xì)胞 - 細(xì)胞之間或者細(xì)胞 - 環(huán)境之間的關(guān)鍵作用,科學(xué)家們開發(fā)了多種方法對細(xì)胞表面進(jìn)行化學(xué)修飾。常見的方法有代謝工程法、脂質(zhì)體融合技術(shù)和非天然氨基酸嵌入技術(shù)等。雖然許多實(shí)驗室都在努力*這些已知的技術(shù),開發(fā)一種溫和、和特異性的新方法仍然是近年來細(xì)胞表面修飾研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)內(nèi)容。而利用酶法修飾可以彌補(bǔ)上述方法的不足。近,新加坡南洋理工大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院的劉傳法(Liu Chuan-Fa)和談秉軍(James P. Tam)教授團(tuán)隊利用一種新型的蛋白連接酶實(shí)現(xiàn)了對活細(xì)菌表面特定膜蛋白的多種修飾。
自南洋理工大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院的談秉軍(James P. Tam)團(tuán)隊報道發(fā)現(xiàn)一種新的多肽連接酶 Butelase 1(蝶豆粘酶)以來,這種酶在生物醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域內(nèi)表現(xiàn)出極大的應(yīng)用前景。Butelase 1(蝶豆粘酶)從一種能產(chǎn)生大環(huán)寡肽的植物 Clitoria ternatea(蝶豆)中提取得到。Butelase 1(蝶豆粘酶)可識別天冬氨酸 - 組氨酸 - 頡氨酸(NHV)的三肽序列中天冬氨酸殘基后面的肽鍵而對其進(jìn)行切割,并使該天冬氨酸和另一肽鏈 N 端殘基連接形成一個新的肽鍵。在迄今發(fā)現(xiàn)的所有蛋白連接酶中,這種酶展示了為的催化動力學(xué)性質(zhì),并且在蛋白修飾、多肽和蛋白鏈的環(huán)化、樹狀多肽物質(zhì)的合成等方面表現(xiàn)出廣泛的應(yīng)用價值。所有這些特征表明 Butelase 1(蝶豆粘酶)在細(xì)胞表面修飾生物工程領(lǐng)域也會是一種非常有效的工具。為此,新加坡南洋理工大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院的劉傳法(Liu Chuan-Fa)和談秉軍(James P. Tam)教授團(tuán)隊合作,通過基因工程在大腸桿菌表面表達(dá)一種能被 Butelase 1(蝶豆粘酶)識別的膜蛋白,利用該酶實(shí)現(xiàn)了對活細(xì)菌表面的多種定向修飾,并引入包括熒光素、生物素、糖多肽以及其他蛋白分子。他們還利用熒光素標(biāo)記的細(xì)菌研究了細(xì)菌在體外與癌細(xì)胞、在體內(nèi)與斑馬魚巨噬細(xì)胞之間的相互作用。該工作為人們今后研究病原細(xì)菌與宿主的相互作用以及開發(fā)以活細(xì)胞為載體的疫苗與藥物等提供了一種新的選擇工具。

 

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