產品屬于：

產品名稱：豬腎細胞    

產品英文：PK-15

貨號：FS-01X9743

細胞培養(yǎng)條件：MEM+10%FBS+1%P/S  

生長狀態(tài)：貼壁生長

產品規(guī)格：1×106

單位：T25/瓶

是否提供細胞STR鑒定：不提供STR鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）37

運輸溫度（℃）：常溫   

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人癌胚鐵蛋白(CEF) ELISA試劑盒英文名稱：Human Carcinoembryonic Ferritin,CEF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人鱗狀細胞癌相關抗原(SCCAg)ELISA試劑盒英文名稱：Human squamous cell carcinoma related antigen,SCCAg ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人腫瘤特異性抗原(TSA) ELISA試劑盒 英文名稱：Human tumor specific antigen,TSA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人黑色瘤轉移表面黏附分子(MMSAM)ELISA試劑盒英文名稱：Human melanoma metastasis surface adhesion molecule,MMSAM ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人乳腺癌易感蛋白2(BRCA-2)ELISA試劑盒英文名稱：Human breast cancer susceptibility protein 2,BRCA-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人凋亡信號調節(jié)激I(ASK-1)ELISA試劑盒英文名稱：Human apoptosis signal regulating kinase 1,ASK-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人Bcl-2相關X蛋白(BAX)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Bcl-2 associated X protein, Bax ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人H-ras ELISA試劑盒英文名稱：Human H-ras ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人c-sis ELISA試劑盒英文名稱：Human c-sis ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人c-jun ELISA試劑盒英文名稱：Human c-jun ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人c-fos ELISA試劑盒英文名稱：Human c-fos ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人c-myc癌基因產物(c-myc)ELISA試劑盒英文名稱：Human c-myc Oncogene product,c-myc ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人Smad1 ELISA試劑盒 英文名稱：Human Mothers against decapentaplegic homolog 1,Smad1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人Smad7 ELISA試劑盒 英文名稱：Human Mothers against decapentaplegic homolog 7,Smad7 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人腫瘤相關抗原(TAA)ELISA試劑盒 英文名稱：Human tumor-associated antigen,TAA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人TGF-β誘導早期基因1(TIEG1)ELISA試劑盒 英文名稱：Human TGF-beta-inducible early response gene-1,TIEG1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人腫瘤血管生長因子(TAF)ELISA試劑盒 英文名稱：Human tumor angiogenesis factors,TAF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人細胞角蛋白20(CK-20)ELISA試劑盒 英文名稱：Human cytokeratin 20,CK-20 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
豬腎細胞AMBP/Alpha 1 microglobulin  α1微球蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

A2BP1/Fox1  共濟失調蛋白2結合蛋白1抗體規(guī)格: 0.2ml

RLLM1/C14orf166  胰腺癌轉移相關蛋白RLLM1抗體規(guī)格: 0.2ml

ABC2/C17orf71  乳腺癌增強蛋白2抗體規(guī)格: 0.2ml

CA8  碳酐相關蛋白8抗體規(guī)格: 0.2ml

CACNB1  鈣通道電壓依賴性β1蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

CDK5RAP3  周期依賴性激5激活結合蛋白C53抗體規(guī)格: 0.2ml

CENPH  著絲粒蛋白H抗體規(guī)格: 0.2ml