ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購優(yōu)勢如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標(biāo)齊全：生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
LentinusciliatusLév. 粗毛斗菇LentinusciliatusLév.安全等級:1模式菌株:no食用17生長條件:23-25℃ 純度：98%

GanodermaLucidum(Leysser:Fries)Karsn 靈芝(紅芝，赤芝)GanodermaLucidum(Leysser:Fries)Karsn安全等級:1模式菌株:no藥用17生長條件:25-27℃ 純度：98%

Ganodermagibbosum(BlumiietNees)Patouillard 凸圓靈芝(白芝)Ganodermagibbosum(BlumiietNees)Patouillard安全等級:1模式菌株:no藥用17生長條件:25-28℃ 純度：98%

SaccharomycescervisiaeHansenvar.ellipsoideus(Hansen)Dekker 橢圓釀酒酵母SaccharomycescervisiaeHansenvar.ellipsoideus(Hansen)Dekker安全等級:1模式菌株:no由AS2.346酵母育成,高溫型果酒酵母13生長條件:25-28℃ 純度：98%

Auriculariapolytricha(Mont.)Sacc. 毛木耳(紫木耳、黃背木耳)Auriculariapolytricha(Mont.)Sacc.安全等級:1模式菌株:no食用17生長條件:20-25℃ 純度：97%

Armillariellatabescens(Scopoci:Fries)Singer 發(fā)光假蜜環(huán)菌Armillariellatabescens(Scopoci:Fries)Singer安全等級:1模式菌株:no治療膽囊炎和食管癌。果樹病原菌，食用和藥用17生長條件:25-28℃ 純度：97%

Rhodotorula│mucilaginosa 膠紅酵母Rhodotorula│mucilaginosa凍干物安全等級:1模式菌株:no釀酒。CM0077生長條件:28-30℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度：98%

Rhodotorulaminuta(Saito)Harrison 紅酵母Rhodotorulaminuta(Saito)Harrison安全等級:1模式菌株:no13生長條件:25-28℃ 純度：98%
Cav-1人窖蛋白ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理Phospho-5-Lipoxygenase (Ser663)  磷化5-脂氧合酶抗體棗仁皂甙D2-TBX2/T-box2(T-box Protein 2)  新型抑癌基因(多肽)

8-OHdG  8-羥基脫氧鳥苷抗體白樺脂甲磺雷沙吉蘭TCF7L2(tranion factor 7-like 2)  轉(zhuǎn)錄因子7類似物2抗原

A2AR  腺苷A2A受體抗體升麻素苷甲磺雷沙吉蘭TDP-43/TARDBP (tar DNA binding protein)  Tar DNA 結(jié)合蛋白43抗原

AACT-Alpha1  α-1抗胰糜蛋白酶抗體升麻素2-吡乙鹽鹽Tenascin  固生蛋白抗原

AAK1  AP2關(guān)聯(lián)激酶1抗體類葉升麻苷(麥角甾苷)2-吡乙鹽鹽TEM 1/CD248(Tumor endothelial marker 1 precursor)  內(nèi)涎蛋白/內(nèi)皮唾液蛋白抗原

AARS2  氨酰tRNA合成酶2抗體異類葉升麻苷(異麥角甾苷)異硫酰甲乙酯TFF3 (trefoil factor3)  三葉肽因子3(多肽)

AAT  α-1抗胰蛋白酶抗體松果菊苷異硫酰甲乙酯TFPI-2 (tissue factor pathway inhibitor-2)  組織因子途徑抑制劑-2抗原

AATK  AATK凋亡關(guān)聯(lián)酪氨激酶抗體5-O-甲基維斯阿米苷4-(甲硫基)TIEG1/KLF10(TGF-beta inducible early response gene 1)  TGF-β誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1抗原
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)