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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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AG 490 (JAK抑制劑)

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產(chǎn)品型號(hào)

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所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-18 10:15:17瀏覽次數(shù):316次

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貨號(hào) FS-X10241
AG 490 (JAK抑制劑)正在熱銷的產(chǎn)品:IL-18R Beta/IL1R7/CD218b/FITC 熒光標(biāo)記白介-18受體β鏈抗體IgG茚三酮,水合 AR,95.0%
IL-19/NG.1/FITC 熒光標(biāo)記白介-19抗體IgG中性紅 for cell culture,≥90%(HPLC)
IL-20R Alpha/IL20RA/FITC 熒光標(biāo)記白介20受體α鏈抗體IgG中性紅 in

中文名稱:AG 490 (JAK抑制劑)

英文名稱:Tyrphostin B42

產(chǎn)品規(guī)格:5mg

貨號(hào):FS-X10241

產(chǎn)品介紹:

英文名稱:Tyrphostin B42

產(chǎn)品規(guī)格:5mg

AG-490 (Tyrphostin B42)是一種EGFR 抑制劑,IC50為0.1 μM,作用于EGFR 比作用于ErbB2選擇性高135倍,對(duì)JAK2也有抑制作用,對(duì)Lck,Lyn,Btk,Syk 和Src 沒有抑制活性。

分子量:294.30

化學(xué)式:C17H14N2O3

:133550-30-8

儲(chǔ)存:-20℃,有效期24個(gè)月

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

釀酒酵母人類白抗原G抗體(N端)Human SLCO4C1 大鼠TGF-β誘導(dǎo)早期基因1(TIEG1)免疫試劑盒

Luteolibacter人類白抗原G抗體(C端)Human SLFNL1 大鼠Tau蛋白免疫試劑盒

埃希氏菌屬缺氧誘導(dǎo)基因95抗體Human SLC43A1 大鼠TAR DNA結(jié)合蛋白43(TARDBP)免疫試劑盒

白乳菇泛蛋白連接E2抗體Human SLCO6A1 大鼠Syndecan-1/CD138(SDC1)免疫試劑盒

高地芽胞桿菌同源盒蛋白HOXC9抗體Human SLC27A3 大鼠Smad7 免疫試劑盒

晦澀小粘束霉環(huán)化核調(diào)控陽(yáng)離子通道蛋白亞型2/4抗體Human SLC30A6 大鼠Smad1 免疫試劑盒

果生鏈核盤菌轉(zhuǎn)錄因子HELT蛋白抗體Human RHOC(Rho-related GTP-binding protein RhoC) 大鼠SHC轉(zhuǎn)化蛋白1(SHC1)免疫試劑盒

云南球蓋菇轉(zhuǎn)錄因子HES6抗體Human SLC35F2 大鼠S100B蛋白(S-100B)免疫試劑盒

騷動(dòng)厄氏菌同源盒蛋白H6亞型2抗體Human SLC35A1 大鼠S100-A5蛋白(S100A5)免疫試劑盒

Sphingomonas phyllosphaerae硫乙酰肝6腦脂轉(zhuǎn)硫1抗體Human SLC34A2 大鼠Rho相關(guān)GTP結(jié)合蛋白R(shí)hoE 免疫試劑盒

球孢白僵菌神經(jīng)保護(hù)肽HN抗體Human SLC36A4 大鼠Rho鳥交換因子7(Arhgef7/Pak3bp/Pixb)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌大鼠細(xì)小病H-1株(H-1)抗體(N端)Human SLC30A6 大鼠Ras相關(guān)蛋白R(shí)ab-11A 免疫試劑盒

麗齒菌屬透明質(zhì)合成1抗體Human SLC25A18 大鼠Ras相關(guān)C3肉底物1(RAC1)免疫試劑盒

美澳型核果褐腐病菌缺氧誘導(dǎo)因子3α/HIF-3α抗體Human SLC34A2 大鼠P選擇(P-Selectin/CD62P)免疫試劑盒

黑曲霉缺氧誘導(dǎo)因子脯酰4羥化抗體Human SLC25A15 大鼠P物質(zhì)受體(SP-R)免疫試劑盒

溶血性曼氏桿菌透明質(zhì)2/玻璃2抗體Human SLC25A22 大鼠P物質(zhì)(SP)免疫試劑盒

炭疽芽孢桿菌Bacillus│anthracis 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%長(zhǎng)春質(zhì)堿

矩圓黑盤孢Melanconium│oblongum Berk. 質(zhì)量規(guī)格:100μg/ml,u=3%文多靈

淡紫擬青霉Paecilomyces│sp. 質(zhì)量規(guī)格:10μg/ml,u=6%(R型)原人參二
AG 490 (JAK抑制劑)球形賴芽孢桿 2-芐基-1-乙his標(biāo)簽蛋白

蚜蟲莫氏黑粉  2--5-氟磷化環(huán)磷腺

金黃色葡萄球 4--N,N-二苯基苯球蛋白A抗體

納西桿屬 2-氨基-5-溴破傷風(fēng)IgG

金乳牛肝 2-氨基-6-血管生成1

美澳型核果褐腐病 2--5-氟吡啶-3-羧球蛋白G a2

美澳型核果褐腐病 5-氨基-2-溴-3-內(nèi)質(zhì)網(wǎng)氨基肽1

門多薩假單胞 2-氨基-3--5-溴吡啶乙酰

蠟樣芽孢桿 溴甲基環(huán)戊烷-SH

熱帶假絲酵母 2-氨基-3--5-溴吡啶N-酰

粉紅聚端孢霉 2-基硅氧基-1,3-丁二烯琥珀酰

暗褐色毛霉 4-異硫基苯組蛋白

枯草芽孢桿 6-羥基-3-噠單水合物抗核糖體P蛋白抗體

三葉草根瘤 香葉基酮載脂蛋白E2

杰丁畢赤酵母 5-甲基-3,4-二苯基異噁唑載脂蛋白E4

 


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