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貨號(hào)	FS-01S63278

公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后*。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

規(guī)格：100管/96樣

檢測方法：微量法

貨號(hào)：FS-01S63278
商品介紹：

測定意義

AsA作為植物細(xì)胞一個(gè)重要生理指標(biāo)，其AsA 的含量、氧化還原狀態(tài)(AsA/DHA 比率)及其合成與代謝相關(guān)酶類活性的變化涉及植物對一系列環(huán)境脅迫的響應(yīng)。DHA是AsA的可逆的氧化型，在生物體內(nèi)，與抗壞血酸共同組成氧化還原系統(tǒng)，具有電子受體的作用。

測定原理：

DTT還原DHA生成AsA，通過測定體系中AsA的生成速率，即可計(jì)算出DHA含量。

自備儀器和用品：

低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液器、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制：

提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提取：

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

胸苷激1熒光Cy3標(biāo)記豬IgGThymidine Kinase 1

N-6-腺特異性DNA甲基轉(zhuǎn)移1熒光Cy3標(biāo)記水貂IgGN-6-Adenine Specific DNA Methyltransferase 1

抗壞血過氧化物熒光Cy3標(biāo)記兔IgMAscorbate peroxidase

β-1,3-葡聚糖熒光Cy3標(biāo)記大鼠IgMβ-1,3 glucanase

丁型肝炎IgM抗體熒光Cy3標(biāo)記重組白介-1受體拮抗劑Hepatitis D virus IgM

白細(xì)胞介36α熒光Cy3標(biāo)記血藍(lán)蛋白Interleukin 36α

白細(xì)胞介36β熒光Cy3標(biāo)記雞卵白蛋白Interleukin 36β

血管內(nèi)皮生長因子受體2熒光Cy3標(biāo)記血白蛋白Vascular endothelial cell growth factor receptor 2

肌漿;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣ATP熒光Cy3標(biāo)記胰糜蛋白SERCA ATPase

細(xì)胞色P4503A4Alexa Fluor 555標(biāo)記羊IgG(流式同型對照)Cytochrome P4503A4

糖基轉(zhuǎn)移Alexa Fluor 555標(biāo)記大鼠IgG(流式同型對照)Glycosyl Transferases

腦啡肽熒光PE-Cy7標(biāo)記兔IgG(流式同型對照)enkephalin

抗肌炎抗體譜3抗體IgG辣根過氧化物標(biāo)記生物MSA3-IgG antibody

心型脂肪結(jié)合蛋白(親和純化) 牛IgGheart fatty acid binding protein

半胱蛋白抑制劑;胱抑C熒光標(biāo)記牛血清白蛋白Cystatin C
DHA氧化型/脫氫抗壞血酸檢測試劑盒微量法鹽分析標(biāo)準(zhǔn)品(R)-(-)-N,N-二甲基-1-(2-聯(lián)膦基）二茂鐵乙 97%Anti-EXPB-2/FITC 熒光標(biāo)記植物延展-βIgG

鹽 BP2007,藥用級(jí)(1R,2R)-二[(2-甲氧基基)基磷]乙烷 97%Anti-Ezrin/Radixin/FITC 熒光標(biāo)記埃茲蛋白抗體IgG

葡聚糖40 分子量40000(R)-(+)-2,2'-聯(lián)[二-(4-基)膦基]-1,1'-聯(lián)萘 98%Anti-Phospho-Ezrin (Tyr353) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化埃茲蛋白抗體IgG

5'-腺核苷二鈉鹽 99%(R)-(+)-2,2'-二(二-3,5-基膦)-1,1'-聯(lián)萘 98%Anti-Phospho-Ezrin (Thr567) /FITC 熒光標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷化埃茲蛋白抗體IgG

腺苷-5′-三磷二鈉鹽(ATP) 99%rac-2-(二叔丁基膦)-1,1′-聯(lián)萘 98%Anti-Fabp2 /FITC 熒光標(biāo)記脂肪結(jié)合蛋白2抗體IgG

腺苷-5′-三磷二鈉鹽(ATP) 99%，用于培養(yǎng)(R)-N,N-二甲基-1-[(S)-1',2-雙(二基膦基)二茂鐵基]乙 98%Anti-FABP(brain)/FITC 熒光標(biāo)記腦型脂肪結(jié)合蛋白抗體IgG

核苷5’-一磷腺苷鈉鹽 99%(R)-(+)-2-[2-(二基膦)基]-4-異基二惡唑 98%Anti-factor V/FITC 熒光標(biāo)記5抗體IgG

抑肽 3-8 TIU/mg(R)-(+)-1,1'-(二基膦基)烷 98%Anti-factor VIII/FITC 熒光標(biāo)記第八因子相關(guān)抗原抗體IgG

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