ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
Shewanella│basaltis 玄武巖希瓦氏菌Shewanella│basaltis分離基物:樣/表層海凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自代十六烷富集菌群821生長(zhǎng)條件:4℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：94%

Rahnella│aquatilis 生拉恩氏菌Rahnella│aquatilis分離基物:樣/表層海凍干物模式菌株:no潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油富集菌群，單菌無降解能力。1001生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：94%

Polaribacr│sp. 地桿菌Polaribacr│sp.分離基物:樣/上層海凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no潛在的有機(jī)污染物降解菌/分離自石油污染海域菌群471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：94%

Fictibacillus│nanhaiensis 南海芽孢桿菌Fictibacillus│nanhaiensis分離基物:樣/底層海斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no深海細(xì)菌14生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Pseudomonas│taiwanensis 中國(guó)臺(tái)灣假單胞菌Pseudomonas│taiwanensis分離基物:土壤/椰子樹腐爛芯覆土凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no近海細(xì)菌471生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：99%

Pseudomonas│mosselii 摩氏假單胞菌Pseudomonas│mosselii分離基物:土壤/浴場(chǎng)海灘沙凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no近海細(xì)菌471生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：average Mn ~2,000

Vibrio│azureus 遠(yuǎn)青弧菌Vibrio│azureus分離基物:生物樣/海灘腐海草凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no近海細(xì)菌471生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：97%

Falsibacillus│pallidus 白色假芽孢桿菌Falsibacillus│pallidus分離基物:土壤/椰子樹腐爛芯覆土凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no近海細(xì)菌33生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法；-80℃冰箱凍結(jié)法；真空冷凍干燥法 純度：96%
Apo-E人載脂蛋白EELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理Phospho-p90RSK (Thr573)  磷化絲氨/蘇氨激酶p90RSK蛋白抗體五加皂苷B2-溴二苯并噻吩Human PTPN6 (Protein Tyrosine Phosphatase, Non Receptor Type 6) ELISA Kit

VIP receptor II  腺苷環(huán)化酶激活肽受體-II/血管活性腸肽受體-II抗體紫丁香酚苷(S)-(+)-香芹Human MGMT (O-6-Methylguanine DNA Methyltransferase) ELISA Kit

PACAP R1/VIP receptor-I  腺苷環(huán)化酶激活肽受體-I抗體五加苷E(S)-(+)-香芹Human PCDH1 (Protocadherin 1) ELISA Kit

PACAP-27/38  腺苷環(huán)化酶激活肽-27/38抗體竹節(jié)香附素ARetapamulinHuman PCDHβ2 (Protocadherin Beta 2) ELISA Kit

PACAP-38  腺苷環(huán)化酶激活肽-38抗體注:五加葉中3,5--1-苯Human FBN1 (Fibrillin 1) ELISA Kit

PADI4  關(guān)節(jié)炎相關(guān)基因抗體柴胡皂苷A3,5--1-苯Human FBN2 (Fibrillin 2) ELISA Kit

PAF  血板活化因子抗體柴胡皂苷CBenfotiamineHuman FBN3 (Fibrillin 3) ELISA Kit

PALB2  癌易感基因相關(guān)蛋白2柴胡皂苷D4-(2-噻唑基偶氮)間苯二酚Human Pg (Progesterone) ELISA Kit
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)