ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術(shù)要求，在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外，有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：
①標(biāo)本因素；
②試劑因素；
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作，必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢(xún)服務(wù)！

公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”，選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下：
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿，細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類(lèi)型的樣本。
5公司產(chǎn)品僅用于科研可檢測(cè)指標(biāo)齊全：生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：
ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
（1）血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（2）血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（3）尿液：
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。
（5）培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
（6）組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。
氨末端激酶1/3抗體英文全稱(chēng)Pannexin-1 英文簡(jiǎn)稱(chēng)PANX1檢測(cè)范圍5780nmol/L-8ng/mL

氨末端激酶3抗體英文全稱(chēng)EphA7-Ab英文簡(jiǎn)稱(chēng)EphA7-Ab檢測(cè)范圍5781nmol/L-80ng/mL

連接介導(dǎo)調(diào)節(jié)蛋白抗體英文全稱(chēng)Cytochrome C oxidase 4英文簡(jiǎn)稱(chēng)COX4檢測(cè)范圍5782nmol/L-2000mU/L

凋亡細(xì)胞清除受體抗體英文全稱(chēng)Signal Peptide, CUB Domain, EGF Like 1英文簡(jiǎn)稱(chēng)SCUBE1檢測(cè)范圍5783nmol/L-5000pg/mL

JWA蛋白抗體英文全稱(chēng)Quinone oxidoreductase 英文簡(jiǎn)稱(chēng)NQO檢測(cè)范圍5784nmol/L-480mIU/L

蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK2抗體英文全稱(chēng)cholesterol 8β hydroxylase英文簡(jiǎn)稱(chēng)CYP8β檢測(cè)范圍5785nmol/L-120mU/mL

活化蛋白激酶D抗體英文全稱(chēng)Osteoglycin英文簡(jiǎn)稱(chēng)OGN檢測(cè)范圍5786nmol/L-10ng/mL

Jun激活區(qū)域-連接蛋白1抗體英文全稱(chēng)mycoplasma IgM antibodoy英文簡(jiǎn)稱(chēng)MCP-IgM檢測(cè)范圍5787nmol/L-

氨末端激酶2抗體英文全稱(chēng)Apoptosis-associated speck-like protein containing a CARD英文簡(jiǎn)稱(chēng)PYCARD檢測(cè)范圍5788nmol/L-500pg/mL

磷酸化蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗體英文全稱(chēng)CDC42英文簡(jiǎn)稱(chēng)CDC42檢測(cè)范圍5789nmol/L-10ng/mL

磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體英文全稱(chēng)AT-Ⅲ英文簡(jiǎn)稱(chēng)AT-Ⅲ檢測(cè)范圍5790nmol/L-8ng/ml

蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體英文全稱(chēng)p-P50英文簡(jiǎn)稱(chēng)p-P50檢測(cè)范圍5791nmol/L-80ng/mL

磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-3抗體英文全稱(chēng)Ultrasensitive-INS英文簡(jiǎn)稱(chēng)U-INS檢測(cè)范圍5792nmol/L-48mU/L

連接粘附分子1抗體英文全稱(chēng)organic cation transporters英文簡(jiǎn)稱(chēng)OCTs檢測(cè)范圍5793nmol/L-30ng/mL

活化蛋白激酶B抗體英文全稱(chēng)14-3-3 protein theta英文簡(jiǎn)稱(chēng)YWHAQ檢測(cè)范圍5794nmol/L-32ng/ml

CD339抗體英文全稱(chēng)organic cation transporters 2英文簡(jiǎn)稱(chēng)43740檢測(cè)范圍5795nmol/L-24ng/mL

人高爾蛋白73(GP-73)ELISA試劑盒SCD1 (C12H5) Rabbit mAb100 ul

人磷脂酰肌蛋白聚糖3(GPC-3)ELISA試劑盒AMPKα1 Antibody20 ul

人糖化依賴(lài)的細(xì)胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒 AMPKα1 Antibody100 ul

人糖化蛋白(GSP)ELISA試劑盒 Lyn (C13F9) Rabbit mAb20 ul

人糖胺聚糖(GAG)ELISA試劑盒Lyn (C13F9) Rabbit mAb100 ul

人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒ERp72 Antibody100 ul

人糖磷脂酰肌(GPI)ELISA試劑盒 Claspin Antibody100 ul

人糖原合成酶激酶(GSK)ELISA試劑盒PRSS15/LONP1 (D8W1J) Rabbit mAb100 ul
IgA豚鼠免疫球蛋白AELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理鼠干因子受體(SCFR)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Schizophyllum commune

大鼠干因子受體(SCFR)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Streptomyces cylindrosporus

人質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Infectious bronchitis virus

鼠質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA Kit，48T/96T拉丁屬名: Nonomuraea turkmeniaca

大鼠質(zhì)衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA Kit，48T/96T注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Flavobacterium sp.

鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA Kit，48T/96T 注意事項(xiàng): 僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的，不可用于人類(lèi)或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子α(TGF-α)ELISA Kit，48T/96T 拉丁屬名: Kloeckera apiculata
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。 
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。 
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。 
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。 
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，最終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)