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上海撫生實業(yè)有限公司
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MDA丙二醛檢測試劑盒微量法

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所  在  地上海市

更新時間:2022-04-11 12:19:10瀏覽次數(shù):137次

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貨號 FS-01S63300
MDA丙二醛檢測試劑盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:甲基化多聚腺苷結(jié)合蛋白抗體植物組織可溶性膜蛋白粗提制備試劑盒
太平洋硫膨大桿菌植物組織可溶性膜蛋白高純制備試劑盒
111-02-4角鯊烯植物組織可溶性胞漿蛋白粗提制備試劑盒
PUC19植物組織可溶性胞漿蛋白高純制備試劑盒

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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后*。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱:MDA丙二醛檢測試劑盒微量法

規(guī)格:100管/96樣

檢測方法:微量法

貨號:FS-01S63300
商品介紹:

測定意義

氧自由基作用于脂質(zhì)的不飽和脂肪酸,生成過氧化脂質(zhì);后者逐漸分解為一系列復(fù)雜的化合物,其中包括MDA。通過檢測MDA的水平即可檢測脂質(zhì)氧化的水平。

測定原理:

MDA與硫代巴比酸(thiobarbituric acid,TBA)縮合,生成紅色產(chǎn)物,在532nm有最大吸收峰,進行比色后可估測樣品中過氧化脂質(zhì)的含量;同時測定600nm下的吸光度,利用532nm與600nm下的吸光度的差值計算MDA的含量。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時,應(yīng)對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1.        加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時藍色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

粗酶液提?。?/span>

1、細胞或組織樣品的制備:

培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細胞數(shù)量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
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小鼠促血小板生成受體抗體聯(lián)免疫試劑盒米川黃桿PKR Antibody

小鼠血栓B2(TXB2)聯(lián)免疫試劑盒白淺灰鏈霉Phospho-c-Kit (Tyr703) (D12E12) Rabbit mAb

小鼠血栓B4(TXB4)聯(lián)免疫試劑盒花園芽孢桿Phospho-c-Kit (Tyr703) (D12E12) Rabbit mAb

小鼠血栓前體蛋白(TpP)聯(lián)免疫試劑盒蘇云金芽胞桿松蠋亞種c-Kit (D13A2) XP® Rabbit mAb

小鼠絡(luò)絲蛋白(RELN)聯(lián)免疫試劑盒產(chǎn)黃青霉c-Kit (D13A2) XP® Rabbit mAb

小鼠胸腺表達趨化因子(TECK)聯(lián)免疫試劑盒草木樨中華根瘤Phospho-Met (Tyr1234/1235) (D26) XP® Rabbit mAb

小鼠甲狀腺球蛋白(TG)聯(lián)免疫試劑盒黑曲霉Phospho-Met (Tyr1234/1235) (D26) XP® Rabbit mAb

小鼠甲狀腺激抗體(TSAb)聯(lián)免疫試劑盒淡紫擬青霉Phospho-ROS1 (Tyr2274) Antibody

小鼠抗促甲狀腺受體抗體(TRAb)聯(lián)免疫試劑盒大腸埃希FastScan™ Phospho-SLP-76 (Ser376) ELISA Kit

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碳酐2抗體Human CDC14B ELISA Kit人血管緊張Ⅰ轉(zhuǎn)化(ACEⅠ)ELISA試劑盒,ACEⅠ ELISA

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