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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司
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SMYD2抑制劑

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產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時(shí)間:2022-05-20 16:54:39瀏覽次數(shù):254次

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貨號(hào) FS-X10708
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MIP-3 Alpha

中文名稱:SMYD2抑制劑

英文名稱:AZ505 ditrifluoroacetate

產(chǎn)品規(guī)格:1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|25mg|50mg|100mg

貨號(hào):FS-X10708

產(chǎn)品介紹:

AZ505ditrifluoroacetate是一種有效的選擇性的SMYD2抑制劑,IC50為0.12μM。

注:本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn),嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號(hào):1035227-44-1

別名:AZ 505 ditrifluoroacetate;AZ-505 ditrifluoroacetate

純度:99.50%

分子量:805.59

儲(chǔ)存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔,通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞,細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000~10000個(gè)細(xì)胞(具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時(shí),使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測(cè)每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率:將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細(xì)胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細(xì)胞),各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細(xì)胞的OD 值,C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =(加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

根霉腸道病71型/手足口病病抗原(C端)Anti-CLASP1 Antibody人紅激因子(ESF)

松口蘑植物擴(kuò)張蛋白ATEXPA10(擬南芥)抗原Anti-CLASP1 Antibody人紅激因子(ESF)

芽孢桿菌埃茲蛋白(多肽)Anti-Claudin 7 Antibody人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)

彎曲芽孢桿菌鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(N端多肽)Anti-CLASP1 Antibody人腫瘤壞死因子相關(guān)激活誘導(dǎo)因子(TRANCE)

大麗輪枝霉鼠疫耶爾森氏菌F1莢膜蛋白(C端多肽)Anti-CLCC1 Antibody人生長激釋放因子(GH-RF)

蠟狀芽孢桿菌腦型脂肪結(jié)合蛋白抗原Anti-CLCF1 Antibody人生長激釋放因子(GH-RF)

淡黃青霉Fas死亡結(jié)構(gòu)域相關(guān)蛋白抗原Anti-CLCN4 Antibody人巨噬趨化因子(MCF)

槐栓菌粘著斑激抗原Anti-CLCN6 Antibody人巨噬趨化因子(MCF)

枯草芽胞桿菌磷化粘著斑激抗原Anti-CLCN7 Antibody人α/β干擾受體(IFN-α/βR)

芽孢桿菌磷化粘著斑激抗原Anti-CLCN7 Antibody人α/β干擾受體(IFN-α/βR)

維多利亞維希尼克氏酵母Fas活化的絲/蘇激抗原Anti-CLCNKA Antibody人B生長因子(BCGF)

微小鏈霉菌原纖維蛋白1抗原Anti-CLDN19 Antibody人B生長因子(BCGF)

細(xì)小磚紅鐮孢菌纖維母生長因子4抗原Anti-CLDN1 Antibody人B分化因子(BCDF)

沼澤類芽孢桿菌纖維母生長因子5抗原Anti-CLDN10 Antibody人B分化因子(BCDF)

不動(dòng)桿菌衰老關(guān)鍵蛋白抗原Anti-CLDN19 Antibody人上皮粘附分子(Ep-CAM/CD362)

黃曲霉FosB抗原Anti-CLDN2 Antibody人上皮粘附分子(Ep-CAM/CD362)

鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激磷抗體串珠鐮孢鼠神經(jīng)元細(xì)胞

原鈣粘蛋白11抗體玖紅穗狀霉小鼠肺鱗癌細(xì)胞

紅細(xì)胞磷脂酰肌聚糖A抗體亞麻刺盤孢人角膜內(nèi)皮細(xì)胞

細(xì)小清蛋白抗體休哈塔假絲酵母小鼠心肌成纖維細(xì)胞
SMYD2抑制劑黃曲霉 3,3-二甲基-1-雌受體

公州類諾卡氏 甲基環(huán)氧烷雌誘導(dǎo)蛋白

黑倚囊霉 4-甲氧基苯乙促卵泡

硫磺 木蠟促腎上皮質(zhì)釋放

蠟樣芽孢桿 6-(馬來酰亞基)己琥珀酰亞酯促腎上腺皮質(zhì)

林生毛霉 四丁基磷二氫催乳

腐皮殼屬 四丁基磷二氫蛋白多糖

無 5-溴間二甲苯多配體蛋白聚糖1

木霉屬 3-甲基-2--1-兒茶

薛瓦酵母 1,4-環(huán)己二兒茶抑

長枝木霉 4-乙酰氨基高遷移率族蛋白B1

玉乳桿 安塞蜜睪酮

根瘤 3-甲基-2-吡啶過氧化

煉乳假絲酵母 四羥甲基硫磷(THPS)核因子κB

大腸埃希 3-呋喃(含不定量的酐)環(huán)氧合2

 


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