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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>核酸檢測(cè)試劑盒>>熒光PCR法>> 50T心病毒(SAFV)核酸檢測(cè)試劑盒
對(duì)蝦黃頭病病毒(YHV)核酸定性檢測(cè)試劑盒
實(shí)時(shí)熒光定量PCR是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來(lái)指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來(lái)指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括定量和相對(duì)定量)和定性分析。主要服務(wù):DNA或RNA的定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
產(chǎn)品名稱 | 分類 | 貨號(hào) |
心病毒(SAFV)核酸檢測(cè)試劑盒 | 熒光-PCR法 | FS-P10489 |
PCR技術(shù)的定量原理:
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擴(kuò)增曲線
在Real-time qPCR中,對(duì)整個(gè)PCR反應(yīng)擴(kuò)增過程進(jìn)行了實(shí)時(shí)的檢測(cè)并記錄其熒光信號(hào),隨著反應(yīng)的進(jìn)行,監(jiān)測(cè)到的熒光信號(hào)可以繪制成一條曲線,即為擴(kuò)增曲線。熒光擴(kuò)增曲線一般分為基線期、指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
在Real-time qPCR擴(kuò)增早期,擴(kuò)增的熒光信號(hào)被熒光背景信號(hào)所掩蓋,無(wú)法判斷產(chǎn)物量的變化,此時(shí)即為基線期。
PCR反應(yīng)過程中產(chǎn)生的DNA拷貝數(shù)是呈指數(shù)形式增加的,隨著反應(yīng)循環(huán)數(shù)的增加,最終PCR反應(yīng)不再以指數(shù)形式生成模板,從而進(jìn)入“平臺(tái)期”。在該時(shí)期,擴(kuò)增產(chǎn)物已不再呈指數(shù)級(jí)的增加,PCR的終產(chǎn)物量與起始模板量之間無(wú)線性關(guān)系,所以根據(jù)最終的PCR產(chǎn)物量不能計(jì)算出初始模板量。
服務(wù)流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1)RT-PCR可以檢測(cè)組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號(hào);
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于液中。
PCR檢測(cè)試劑盒:
(一)總RNA提取
取液氮凍存腦組織置于玻璃勻漿器中,按100g:3ml的比例加入Trizol試劑,嚴(yán)格按照TrizolRNA提取試劑盒說(shuō)明書的流程進(jìn)行。
(1)加Trizol(按3ml/100mg組織,寧多勿少)置于玻璃勻漿器中勻漿后,冰浴10-1min。
(2)移入1.5mlEP管中,4ºC 13000g離心10min。
(3)上清液移至另一EP管中,室溫放置10-15min。
(4)加入0.2ml/1mlTrizol,振蕩15s,室溫置5min。
(5)4ºC 12000g離心15min。
(6)仔細(xì)吸取上層水相,移至新的EP管中。
(7)加入0.5ml異丙醇/1mlTrizol,振搖,置室溫10min。
(8)4ºC 12000g離心10min,EP管底部可見白色沉淀物。
(9)棄上清,紙巾吸干,加入75%乙醇1ml,振搖,充分洗滌沉淀。
(10)4ºC 11000g離心5min。
(11)吸盡乙醇,空氣干燥10min(可離心加快干燥,盡量吸盡離心液體)。
(12)半透明時(shí)將RNA溶于去核酸酶的水20ul中(可吹打混勻),-20ºC凍存?zhèn)溆谩?/span>
(13)所提取的總RNA用核酸蛋白分析儀分析RNA含量和純度,所有標(biāo)本260/280nm吸光度的比值均為1.8-2.0。
(14)取所提取的總RNA用1%瓊脂糖凝膠電泳,顯示出清晰的28s和18s兩條rRNA。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077清酒酵母。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法
青霉屬培養(yǎng)基: CM0014抗癌活性提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28C 真空冷凍干燥
炭疽芽孢桿菌培養(yǎng)基: 832模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 30℃ 真空冷凍干燥法
炭疽芽胞桿菌抗炭疽血清及沉淀素血清模式菌株: no炭疽山羊皮提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3培養(yǎng)基: 335生長(zhǎng)條件: 37
AS1.1852培養(yǎng)基: 62乳制品發(fā)酵;食品飲料種屬: Bifidobacteriumbifidum(Tissier)Orla-Jensen安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 37℃
結(jié)核分枝桿菌生長(zhǎng)條件: 37℃研究提供形式: 凍干物安全等級(jí): 3模式菌株: no 真空冷凍干燥法
-727℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
正青霉屬活性物質(zhì),二氫乳脫氫酶抑制活性模式菌株: no土壤提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: CM0018生長(zhǎng)條件: 26C
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077苕干原料發(fā)酵制酒精。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28-30℃ 定期移植法
黑海海單胞菌培養(yǎng)基: 524模式菌株: no海洋沉積物提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 28℃ 真空冷凍干燥法
皺褶假絲酵母培養(yǎng)基: 0013模式菌株: no花提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 25-28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;真空冷凍干燥法
地衣芽孢桿菌培養(yǎng)基: 33模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1生長(zhǎng)條件: 37℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法;其他
AS2.2啤酒酵母模式菌株: no種屬: Saccharomyces│cerevisiae提供形式: 凍干物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 0013生長(zhǎng)條件: 25-28℃
-728℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥
釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077發(fā)酵制清酒。提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1模式菌株: no生長(zhǎng)條件: 28-30℃ 定期移植法
秀珍菇食用菌模式菌株: no朽木提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級(jí): 1培養(yǎng)基: 17生長(zhǎng)條件: 20℃
4-羥基-2-乙 3,3',5,5'-四叔丁基-4,4'-聯(lián)醌
3,5,6-三-2-醇鈉鹽 酐 2-基-6-并噻唑
6-異 肌酐 1-甲基-4-對(duì)基醌
4--2-(基)甲酰 偏三酐 對(duì)羥基甲醚
3-PHENYL-2-PROPYN-1-OL 3-基-2--1-醇 1504-58-1
2-Deoxy-D-glucose 2-脫氧-D-葡萄糖 154-17-6
Acid Red 27 莧菜紅 915-67-3
Bromopyrogallol Red 溴鄰三酚紅 16574-43-9
大鼠誘導(dǎo)型一氧化氮合成酶(iNOS)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
人胸腺依賴性抗原(TD-Ag)免疫試劑盒 Human thymus-depende aigen,TD-Ag ELISA Kit
軍團(tuán)菌抗原(LP Ag)ELISA試劑盒 ,英文名: LP Ag ELISA Kit
Ratlipoproteinlipase,LPLELISA試劑盒大鼠脂蛋白脂酶(LPL)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
Humangrowthhormonerelasingfactor,GH-RFELISA試劑盒人生長(zhǎng)激素釋放因子(GH-RF)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
HumanLegionellaaibodyIgA,LPAb-IgAELISAKit人軍團(tuán)菌抗體IgA(LPAb-IgA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
心病毒(SAFV)核酸檢測(cè)試劑盒葒草苷28608-75-5中文別名:葒草素
英文名:Orientin
登錄號(hào):28608-75-5
分子式:C21H20O11
分子量:448.01
分子結(jié)構(gòu):
規(guī)格:20mg/支
純度:≥ 98%
用途:用于含量測(cè)定/鑒定/藥理實(shí)驗(yàn)等。
提取來(lái)源:毛茛科植物金蓮花
藥理藥效:葒草苷對(duì)缺氧-復(fù)氧心肌細(xì)胞損傷具有一定的保護(hù)作用。
貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光
有效期: 2年
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