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GOD葡萄糖氧化酶檢測試劑盒可見分光光度法

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產品型號

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廠商性質經銷商

所  在  地上海市

更新時間:2022-04-11 12:20:27瀏覽次數:178次

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貨號 FS-01S63305
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產品名稱:GOD葡萄糖氧化酶檢測試劑盒可見分光光度法

規(guī)格:50管/24樣

檢測方法:可見分光光度法

貨號:FS-01S63305
商品介紹:

測定意義

GOD(EC 1.1.3.4)廣泛存在于動物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產生H2O2,是生物體中產生活性氧的代謝途徑之一。

測定原理:

GOD催化產生H2O2,過氧化物酶在有氧存在時催化H2O2分解產生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧化生成有色物質,顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線性關系。

試驗中所需的儀器和設備:

可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、臺式離心機、可調式移液器、1 mL玻璃比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。

試劑的組成和配制:

提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;

試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;

試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;

試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;

試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
QQ截圖20220307153604.png

粗酶液提?。?/span>

1、細胞或組織樣品的制備:

培養(yǎng)細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量(104個):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1ml提取液),超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、血清(漿)樣品:直接檢測。

操作步驟:

實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。

1.        加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.        棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時內配制),酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。

3.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

4.        每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。

5.        溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶標板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7.       依序每孔加終止溶液50μl,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8.       用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進行檢測。

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GOD葡萄糖氧化酶檢測試劑盒可見分光光度法正丁 農殘級十八 ≥97.0% (GC)MKK3(MAP Kinase Kinase 3)  絲裂原活化蛋白激MKK3/6抗原

正丁 用于分子生物學, ≥99%辛 99%P53(wt-p53)  腫瘤抑制基因抗原(野生型P53)

正丁 光譜純, 99.5%十八 ≥99.0% (GC)Mtp53(Mutant type p53)  突變型P53抗原

正丁 ≥99.9%, FCC1,3-二 98%WIG-1(wtp53-induced gene 1)  野生型p53誘導基因1抗原

 ACS,≥99.5%聚二烯二甲基氯化銨溶液 Mw <100,000 ,35 wt. % 水溶液,100-200P73 protein  P73腫瘤抑制基因抗原

2-丁酮 AR, ≥99%聚二烯二甲基氯化銨溶液Mw 100,000-200,000 ,20 wt. % 水溶液,6p70 S6 Kinase/P70 Beta1  p70S6Kb抗原

2-丁酮 CP,99.0% (劇品)Mw 200,000-350,000 ,20 wt. % 水溶液,250-500 cP (25 °C) PALB2(partner and locaizer of BRCA2)  癌易感基因相關蛋白2

2-丁酮 for HPLC, ≥99.7%Mw 400,000-500,000 ,20 wt. %水溶液,800-1000 cP (25 °C) PAFR/PTAFR  血小板活化因子受體抗原

 


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