當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>科研細胞>>細胞>> 中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系
| 產地 | 國產 | 加工定制 | 是 |
|---|---|---|---|
| 適用領域 | 科研 | 貨號 | FS-01X9735 |
產品屬于:
產品名稱:中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系
產品英文:CHO-K1
貨號:FS-01X9735
細胞培養(yǎng)條件:F12K+10%FBS+1%P/S
生長狀態(tài):貼壁生長
產品規(guī)格:1×106
單位:T25/瓶
是否提供細胞STR鑒定:不提供STR鑒定報告
保存培養(yǎng)溫度(℃)37
運輸溫度(℃):常溫
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞 在實驗過程中,根據要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結構、生命活動等。 2.研究條件可以人為控制 pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。 3.研究的樣本可以達到比較均一性 通過細胞培養(yǎng)一定代數后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。 4.研究內容便于觀察、檢測和記錄 采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。 2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。 3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。 4.將細胞培養(yǎng)瓶內的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。 6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。 7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
人S100B蛋白(S-100B)ELISA試劑盒英文名稱:Human Soluble protein-100B,S-100B ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人β內啡(β-EP)ELISA試劑盒英文名稱:human Beta-Endorphin,β-EP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人原鈣黏1(PCDH1)ELISA試劑盒 英文名稱:Human protocadherin 1,PCDH1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人皮膚T細胞虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)ELISA試劑盒英文名稱:Human cutaneous T cell-attracting chemokine,CTACK ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人胸腎表達趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA試劑盒英文名稱:Human Breast and kidney expressed chemokine,BRAK ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人B-淋巴細胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒 英文名稱:Human B-Lymphocyte Chemoattractant 1,BLC-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人結締組織活化Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA試劑盒 英文名稱:Human connective tissue-activating peptide Ⅲ,CTAPⅢ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
A Fc段受體Ⅰ(FcαRⅠ/CD89)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Receptor Ⅰ for the Fc region of immunoglobulin A,FcαRⅠ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
E Fc段受體Ⅱ(FcεRⅡ/CD23)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin E,FcεRⅡ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
G Fc段受體Ⅲ(FcγRⅢ/CD16)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Receptor Ⅲ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅢ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
G Fc段受體Ⅱ(FcγRⅡ/CD32)ELISA試劑盒 英文名稱:Human Receptor Ⅱ for the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅡ ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
G Fc段受體Ⅰ(FcγRⅠ/CD64)ELISA試劑盒 英文名稱:Human ReceptorⅠfor the Fc region of immunoglobulin G,FcγRⅠ ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
人粒細胞趨化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)ELISA試劑盒英文名稱:Human granulocyte chemotactic protein-2,GCP-2 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
人ω干擾(IFN-ω/IFNB)ELISA試劑盒英文名稱:Human Interferon ω,IFN-ω ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人糖基化依賴的細胞黏附分子(GlyCAM-1)ELISA試劑盒 英文名稱:Human glycosylation-dependent cell adhesion molecule-1,GlyCAM-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人干擾調節(jié)因子(IRF)ELISA試劑盒 英文名稱:Human interferon Regulatory Factor,IRF ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人淋巴毒β(LTB)ELISA試劑盒 英文名稱:Human lymphotoxinβ,LTB ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
人淋巴毒α(LTA)ELISA試劑盒 英文名稱:Human lymphotoxinα,LTA ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
中國倉鼠卵巢細胞k1 亞克隆系 SNX27 SNX27蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
TRPV4/TRP12 瞬時受體電位蛋白12抗體規(guī)格: 0.2ml
TH/T-H glycoprotein TH糖蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml
UHRF1 核蛋白95抗體規(guī)格: 0.2ml
PPP4C /蛋白磷4C抗體規(guī)格: 0.2ml
GNLY/NKG5 顆粒溶抗體規(guī)格: 0.2ml
Tuftsin 促吞噬抗體規(guī)格: 0.2ml
LHR/CGR 促黃體生成受體抗體規(guī)格: 0.1ml
請輸入賬號
請輸入密碼
以上信息由企業(yè)自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業(yè)負責,儀表網對此不承擔任何保證責任。
溫馨提示:為規(guī)避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。