當前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實驗原理>>人ELISA試劑盒實驗原理>> 48T/96TTXB2人血栓素B2ELISA試劑盒實驗原理
公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購優(yōu)勢如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強
4適用于體液、組織勻漿,細胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測指標齊全:生長因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | TXB2人血栓素B2ELISA試劑盒實驗原理 |
英文名稱 | Human Thromboxane B2, TX-B2 Elisa Kit |
貨號 | FS-H63635 |
ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。 但ELISA測定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測過程中除正常反應外,有時常見到一些錯誤的結(jié)果。
引起ELISA測定錯誤結(jié)果的原因主要有:
①標本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實驗過程中請嚴格按照使用說明操作,必能得出準確的實驗結(jié)果,可提供免費技術(shù)咨詢服務!
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樣本實驗前準備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(2)血漿:
應根據(jù)標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(3)尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
(4)細胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。
(5)培養(yǎng)細胞
檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
(6)組織標本
切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設3個平行孔;設兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細胞裂解液100μl;另設一個空白對照孔,加入純細胞裂解液100μl。
(2)酶標板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準
Campylobacr│fetus subsp.jejuni 胎兒彎曲菌空腸亞種Campylobacr│fetus subsp.jejuni凍干物安全等級:3模式菌株:no制備血清 1CM0112生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:98+%,ee 99%
Moraxella│lacunata 腔隙莫拉氏菌Moraxella│lacunata凍干物安全等級:2模式菌株:noCM0010生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:99+%
Neisseria│subflava 微黃色奈瑟氏菌Neisseria│subflava凍干物安全等級:3模式菌株:noCM0109生長條件:37℃存儲條件:真空冷凍干燥法 純度:99+%
Providencia│stuartii 司徒氏普羅菲登斯菌Providencia│stuartii其他安全等級:3模式菌株:no4 4CM0051生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:99+%
Providencia│alcalifaciens 產(chǎn)普羅菲登斯菌Providencia│alcalifaciens其他安全等級:3模式菌株:no32 11CM0051生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:>98.0%(GC)
Providencia│sp. 普羅菲登斯菌Providencia│sp.其他安全等級:3模式菌株:no34 -CM0051生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:>98.0%(GC)
Salmonella│II 沙門氏菌第Ⅱ亞屬Salmonella│II其他安全等級:2模式菌株:noCM0051生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:>98.0%(GC)
Citrobacr│freundii 弗勞地拘櫞桿菌Citrobacr│freundii其他安全等級:3模式菌株:no6 16CM0051生長條件:37℃存儲條件:-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:>98.0%(GC)
TXB2人血栓素B2ELISA試劑盒實驗原理LDH 乳脫氫酶抗體氧沙星二甲基二硫代氨 水合物Human FBLN2 (Fibulin 2) ELISA Kit
Mannan Binding Lectin 甘露聚糖結(jié)合凝集素抗體左氧沙星8-羥基喹啉-5-磺 水合物Human PDGFA (Plaet Derived Growth Factor Subunit A ) ELISA Kit
LEF-1 淋巴增強因子-1抗體羅沙星8-羥基喹啉-5-磺 水合物Human PDGFB (Plaet Derived Growth Factor Subunit B) ELISA Kit
Leptin 瘦素抗體培沙星硝銦水合物Human ORM2 (Orosomucoid 2) ELISA Kit
Leptin 瘦素抗體司帕沙星硝銦水合物Human CG (Cryoglobulin) ELISA Kit
Leptin receptor 瘦素受體抗體頭孢曲松硝銦水合物Human FBLN3 (Fibulin 3) ELISA Kit
Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長)頭孢克洛3-異喹啉甲 水合物Human GM-CSF Ab (Anti-Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor Antibody) ELISA Kit
Leptin receptor(long) 瘦素受體抗體(長)苯唑西林麥芽三糖水合物Human PRG4 (Proteoglycan 4) ELISA Kit
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