產(chǎn)品屬于：

產(chǎn)品名稱：心肌干細胞    

產(chǎn)品規(guī)格：5×105

貨號：FS-01X9784

產(chǎn)品類型：原代細胞

單位：T25/瓶

提供細胞鑒定：提供免疫熒光鑒定報告

保存培養(yǎng)溫度（℃）：37

運輸溫度（℃）：常溫

細胞培養(yǎng)的優(yōu)點：

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。

2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。

二．細胞處理：

1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

人α1(Thymosin α1)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Thymosin α1 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人補體調節(jié)蛋白(CCP)ELISA試劑盒 英文名稱：Human complement control protein,CCP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人血小板堿性蛋白(PBP/CXCL7)ELISA試劑盒 英文名稱：Human platelet basic protein,PBP ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人類白細胞抗原C(HLA-C)ELISA試劑盒英文名稱：Human leukocyte antigen C,HLA-C ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人甘露糖凝集受體(MBLR)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Mannma binding lectin receptor,MBLR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人纖溶/纖維蛋白溶(PL/Fbn)ELISA試劑盒 英文名稱：Human plasmin/fibrinolysin,PL/Fbn ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人B細胞受體(BCR)ELISA試劑盒 英文名稱：Human B cell receptor,BCR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人表面膜免疫球蛋白M(mIgM)ELISA試劑盒 英文名稱：Human membrane IgM,mIgM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人表面膜免疫球蛋白D(mIgD)ELISA試劑盒 英文名稱：Human membrane IgD,mIgD ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T

人殺傷細胞免疫球蛋白樣受體(KIR)ELISA試劑盒 英文名稱：Human killer cell immnoglobulin-like receptor,KIR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人殺傷細胞凝集樣受體(KLR)ELISA試劑盒 英文名稱：Human killer cell lectin-like receptor,KLR ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人甘露糖結合蛋白/甘露糖結合凝集(MBP/MBL)ELISA試劑盒 英文名稱：Human Mannma binding protein/mannan binding lectin,MBP/MBL ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人膜攻擊復合物(MAC)ELISA試劑盒 英文名稱：Human membrane attack complex,MAC ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人優(yōu)球蛋白(EL)ELISA試劑盒 英文名稱：Human EuglobulinLysis,EL ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人游離血紅蛋白(f-Hb)ELISA試劑盒 英文名稱：Human free haemoglobin,f-Hb ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人1(PRM1)ELISA試劑盒英文名稱：Human Protamine 1,PRM1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人一氧化碳血紅蛋白(HbCO)ELISA試劑盒 英文名稱：Human carboxyhemoglobin,HbCO ELISA Kit規(guī)格:96T/48T

人血小板相關免疫球蛋白(PAIg)ELISA試劑盒 英文名稱：Human platelet-associated immunoglobulins,PAIg ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
心肌干細胞MAL  T淋巴細胞成熟相關蛋白抗體規(guī)格: 0.2ml

NOX5  還原型輔Ⅱ氧化5/煙酰腺二核磷抗體規(guī)格: 0.2ml

Nucleostemin  核干細胞因子抗體(鳥核結合蛋白3)規(guī)格: 0.2ml

PDCD10  凋亡相關蛋白10抗體規(guī)格: 0.2ml

Fascin/Actin bundling protein  肌動蛋白結合蛋白Fascin抗體規(guī)格: 0.2ml

SLPI/ALK1  分泌型白細胞蛋白抑制因子抗體規(guī)格: 0.2ml

TPST1  酪蛋白硫轉移1抗體規(guī)格: 0.2ml

TPST2  酪蛋白硫轉移2抗體規(guī)格: 0.2ml