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GEHMT2和EHMT1抑制劑

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所  在  地上海市

更新時間:2022-05-18 15:32:34瀏覽次數:227次

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貨號 FS-X10527
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中文名稱:GEHMT2和EHMT1抑制劑

英文名稱:UNC0638

產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號:FS-X10527

產品介紹:

英文名稱:UNC0638

產品規(guī)格:1mL(10mM)|5mg|10mg|50mg|100mg

UNC0638是一種有效的G9a(EHMT2)(IC50<15nM)和GLP(EHMT1)(IC50=19nM)抑制劑。

注:本品僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他用途!

號:1255580-76-7

純度:98.60%

分子式:C??H??N?O?

分子量:509.73

儲存條件:-20℃,有效期2年,溶入溶劑后-20℃請盡量在一個月內使用。

培養(yǎng)操作步驟:

1.公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時;

4.將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時,將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

實驗報告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔,通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞,細胞毒性實驗每孔加入100微升5000~10000個細胞(具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小,細胞增殖速度的快慢等決定)。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0~10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃,含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小時,使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度(如無570nm 濾光片,可以使用560-600nm 的濾光片)。

8、結果分析

a、細胞的存活率:將各測試孔的OD 值減去本底OD 值(*培養(yǎng)基加MTT,無細胞)或空白藥物孔OD 值(*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT,無細胞),各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示,T 為加藥細胞的OD 值,C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =(加藥細胞OD/對照細胞OD)×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

泡盛曲霉酪相關蛋白1抗體Anti-IL7R Antibody松弛肽(RLN)

灰銹赤鏈霉菌推定NFκB激活蛋白20抗體Anti-ING1 Antibody松弛/胰島樣肽受體3(RXFP3)

釀酒酵母Src激活和信號分子蛋白抗體Anti-INA Antibody松弛/胰島樣肽受體1(RXFP1)

野別樣希瓦氏菌腫瘤壞死因子受體相關蛋白6結合蛋白抗體Anti-INPP5D Antibody四旋蛋白9(TSPAN9)

科貝特氏菌屬B淋巴基因1抗體Anti-INHA(Inhibin α) Antibody四旋蛋白8(TSPAN8)

紅色紅菇T活化連接蛋白抗體Anti-Inhibin alpha/INHA Antibody四旋蛋白7(TSPAN7)

青紫鏈霉菌轉錄共激活因子TAZ抗體Anti-INPPL1 Antibody四旋蛋白6(TSPAN6)

多主葡萄殼菌凝血(II)輕鏈抗體Anti-Insig1 Antibody四旋蛋白5(TSPAN5)

維氏紅細菌凝血(II)激活肽1抗體Anti-INSR Antibody四旋蛋白4(TSPAN4)

靈芝(紅芝, 赤芝)凝血(II)激活肽2抗體Anti-INSR Antibody四旋蛋白30(TSPAN30)

球孢白僵菌Tafazzin蛋白抗體Anti-Integrin alpha V/ITGAV Antibody四旋蛋白3(TSPAN3)

圣保羅沙門氏菌TEC酪激蛋白抗體Anti-Integrin beta 4/ITGB4 Antibody四旋蛋白27(TSPAN27)

鹽反硝化枝芽孢桿菌鈣轉運蛋白1抗體Anti-Integrin beta 5/ITGB5 Antibody四旋蛋白2(TSPAN2)

綠色粘帚霉金屬蛋白組織抑制因子-2抗體Anti-IQGAP1 Antibody四旋蛋白1(TSPAN1)

腫瘤壞死因子配體超家族成員19抗體Anti-IQGAP1 Antibody四加半LIM域蛋白1(FHL1)

高地芽孢桿菌腫瘤壞死因子配體超家族成員9抗體Anti-IQGAP2 Antibody死亡誘導終結因子1(DIDO1)

SLU7蛋白抗體緩慢葡萄球菌小鼠神經小膠質細胞

絲/蘇蛋白磷3B抗體食菌屬小鼠肺泡巨噬細胞

絲/蘇激25抗體噬瓊膠海水菌小鼠小腦顆粒細胞

絲蛋白抑制劑A10抗體梭形芽孢桿菌屬小鼠神經元細胞
GEHMT2和EHMT1抑制劑淡紫擬青霉 癸二E選擇

麥根腐平臍蠕孢 3-溴-4-氟FMS樣酪激3

黑曲霉 2-乙基苯肼 鹽鹽MAX二聚化蛋白1

枯草芽孢桿 噻吩-2-頻哪酯Mx基因

枯草芽孢桿 Fmoc-L-beta-高苯N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖

皺紋單胞 Fmoc-L-beta-高異亮S100B蛋白

白葉枯病* Fmoc-3-L-氨基丁Toll樣受體4

鑲邊鏈霉 FMOC-L-β-高亮Toll樣受體7

葡萄座腔 (S)-1-Fmoc--3-甲T亞群

大腸桿 Fmoc-L-3-吖丁啶羧α干擾

枯草芽孢桿 苯乙烯-D8β干擾

穗狀平臍蠕孢 2,3,4-三氟甲苯γ氨基丁

同心環(huán)青霉 2,5-二氟苯γ干擾

粉肉擬層孔 四聚乙二單辛白蛋白

大腸埃希氏 1-Boc-3-氨基吖丁啶白分化抗原4

 


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