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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>生化檢測(cè)試劑盒>>淀粉系列>> GBSS結(jié)合態(tài)淀粉合成酶檢測(cè)試劑盒微量法
| 貨號(hào) | FS-01S63569 |
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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒,質(zhì)量信得過產(chǎn)品,售后*。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位,竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。
產(chǎn)品名稱:GBSS結(jié)合態(tài)淀粉合成酶檢測(cè)試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測(cè)方法:微量法
貨號(hào):FS-01S63569
商品介紹:
測(cè)定意義 GBSS(EC 2.4.1.21)以束縛態(tài)存在于淀粉體中,催化淀粉鏈的加長(zhǎng)反應(yīng),主要負(fù)責(zé)直鏈淀粉的合成。 測(cè)定原理 GBSS催化ADPG與淀粉引物(葡聚糖)反應(yīng),將葡萄糖分子轉(zhuǎn)移到淀粉引物上,同時(shí)生成ADP;進(jìn)一步通過反應(yīng)體系中添加的丙酮酸激酶、己糖激酶和6-磷酸葡萄糖脫氫酶依次催化NADP+還原為NADPH,其中NADPH生成量與前一步反應(yīng)生成的ADP數(shù)量呈正比,通過340nm下測(cè)定NADPH的增加量,可以計(jì)算GBSS活性。 需自備的的儀器和用品 紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。 |
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。 2、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
雞末端運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1(SMN1)聯(lián)免疫試劑盒乳桿屬Human HJV/HFE2 (Hemojuvelin/Hemochromatosis Type 2) ELISA Kit
雞內(nèi)皮糖蛋白(ENG/CD105)聯(lián)免疫試劑盒絨毛青霉Human KLK1 (Kallikrein 1) ELISA Kit
雞肌腱蛋白X(TNX)聯(lián)免疫試劑盒柄桿Human LXRα (Liver X Receptor Alpha) ELISA Kit
雞CXC趨化因子受體3(CXCR3)聯(lián)免疫試劑盒 尖孢鐮刀Human dDAVP (1-Desamino-8D-Arginine Vasopressin) ELISA Kit
雞Ⅻ(F12)聯(lián)免疫試劑盒 生癌腸桿Human HSPβ6/HSP-20 (Heat Shock Protein Beta 6) ELISA Kit
雞粒特異性抗核抗體(GSANA)聯(lián)免疫試劑盒 大腸桿Human HSP-27/HSPB1 (Heat Shock Protein 27) ELISA Kit
雞白介12(IL-12)聯(lián)免疫試劑盒白僵Human HSP-40 (Heat Shock Protein 40) ELISA Kit
雞卵泡抑樣蛋白1(FSTL1)聯(lián)免疫試劑盒 土曲霉金色變種Human HSP-60/HSPD1 (Heat Shock Protein 60) ELISA Kit
雞IV型膠原α1(COL4α1)聯(lián)免疫試劑盒 地衣芽孢桿Human HSP-70 (Heat Shock Protein 70) ELISA Kit
雞前梯度蛋白2(AGR2)聯(lián)免疫試劑盒 嗜鹽動(dòng)性球Human HSP-90 (Heat Shock Protein 90) ELISA Kit
雞趨化因子樣因子(CKLF)聯(lián)免疫試劑盒三葉草根瘤Human HSP gp96 (Heat Shock Protein glycoprotein 96) ELISA Kit
雞多巴受體D5(D5R/DRD5)聯(lián)免疫試劑盒木賊鐮孢Human HSF2 (Heat Shock Transcription Factor 2) ELISA Kit
雞Podocin蛋白(PDCN)聯(lián)免疫試劑盒麥根腐平臍蠕孢Human HSF1 (Heat Shock Transcription Factor 1) ELISA Kit
雞芳香烴受體(AhR)聯(lián)免疫試劑盒 平菇(南京1號(hào))Human PSG1/SP1 (Pregnancy Specific Beta-1-Glycoprotein 1) ELISA Kit
雞髓分化因子88(MYD88)聯(lián)免疫試劑盒青霉 Human LZM (Lysozyme) ELISA Kit
GBSS結(jié)合態(tài)淀粉合成酶檢測(cè)試劑盒微量法正 standard for GC,>99.5%(GC)PH標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液 pH=7.00±0.02 (25℃)DR3/TRAMP (death receptor-3) DR3 死亡受體(抗原)
正 98%-氯化銨緩沖溶液 pH≈10E7 protein/HPV 16 (Human papillomavirus type 16) 人瘤病16型E7蛋白抗原
正 99%*標(biāo)準(zhǔn)溶液 1.000mol/L (1N)EGF-R (Epidemal growth factor receptor) 表皮生長(zhǎng)因子受體(抗原)
三乙 AR,99.0%*標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.5000mol/L (0.5N)Eukaryotic aspartyl protease(Rice) 天冬蛋白家族蛋白(水稻蛋白的一種)(抗原)
三乙 for HPLC, ≥99.5% (GC)*標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.2000mol/L (0.2N)FAM3B/PANDER(PANcreatic DERived factor) 一種新型的胰島因子(抗原)
三正 GR,99%*標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.1000mol/L (0.1N)Fabp2 (fatty acid binding protein 2, intestinal) 脂肪結(jié)合蛋白2(抗原)
三正 CP,98.0%硫標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.5000mol/L(1N)ECG2 (sophagus cancer-related gene-2) 食道癌相關(guān)基因(抗原)
三正丁 GCS, ≥99.5% (GC)硫標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.2500mol/L(0.5N)Fibronectin (FN) 纖維連結(jié)蛋白(多肽抗原)
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