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上海撫生實業(yè)有限公司
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當(dāng)前位置:上海撫生實業(yè)有限公司>>核酸檢測試劑盒>>熒光PCR法>> 50T沙門氏菌SPP-sdfi核酸檢測試劑盒

沙門氏菌SPP-sdfi核酸檢測試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號50T

品       牌其他品牌

廠商性質(zhì)經(jīng)銷商

所  在  地上海市

更新時間:2021-05-10 12:59:09瀏覽次數(shù):173次

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沙門氏菌SPP-sdfi核酸檢測試劑盒保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:沙門氏菌SPP-sdfi核酸檢測試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品貨號:FS-P10416
產(chǎn)品分類:熒光PCR法
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
產(chǎn)品特點:
本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
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實驗過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟 
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
加ddH2O至               50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
實時熒光定量PCR:
實時熒光定量PCR技術(shù)有效地解決了傳統(tǒng)定量只能終點檢測的局限,實現(xiàn)了每一輪循環(huán)均檢測一次熒光信號的強度,并記錄在電腦軟件之中,通過對每個樣品Ct值的計算,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得定量結(jié)果。因此,實時熒光定量PCR無需內(nèi)標(biāo)是建立在兩個基礎(chǔ)之上的:
1)Ct值的重現(xiàn)性PCR循環(huán)在到達(dá)Ct值所在的循環(huán)數(shù)時,剛剛進入真正的指數(shù)擴增期(對數(shù)期),此時微小誤差尚未放大,因此Ct值的重現(xiàn)性,即同一模板不同時間擴增或同一時間不同管內(nèi)擴增,得到的Ct值是恒定的。
2)Ct值與起始模板的線性關(guān)系由于Ct值與起始模板的對數(shù)存在線性關(guān)系,可利用標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知樣品進行定量測定,因此,實時熒光定量PCR是一種采用外標(biāo)準(zhǔn)曲線定量的方法。
外標(biāo)準(zhǔn)曲線的定量方法相比內(nèi)標(biāo)法是一種準(zhǔn)確的、值得信賴的科學(xué)方法。利用外標(biāo)準(zhǔn)曲線的實時熒光定量PCR是迄今為止定量最準(zhǔn)確,重現(xiàn)性*定量方法,已得到的*,廣泛用于基因表達(dá)研究、轉(zhuǎn)基因研究,藥物療效考核、病原體檢測等諸多領(lǐng)域。
定量PCR方法:
a、競爭法
選擇由突變克隆產(chǎn)生的含有一個新內(nèi)切位點的外源競爭性模板。在同一反應(yīng)管中,待測樣品與競爭模板用同一對引物同時擴增(其中一個引物為熒光標(biāo)記)。擴增后用內(nèi)切酶消化PCR產(chǎn)物,競爭性模板的產(chǎn)物被酶解為兩個片段,而待測模板不被酶切,可通過電泳或高效液相將兩種產(chǎn)物分開,分別測定熒光強度,根據(jù)已知模板推測未知模板的起始拷貝數(shù)。
b、內(nèi)參照法
在不同的PCR反應(yīng)管中加入已定量的內(nèi)標(biāo)和引物,內(nèi)標(biāo)用基因工程方法合成。上游引物用熒光標(biāo)記,下游引物不標(biāo)記。在模板擴增的同時,內(nèi)標(biāo)也被擴增。在PCR產(chǎn)物中,由于內(nèi)標(biāo)與靶模板的長度不同,二者的擴增產(chǎn)物可用電泳或高效液相分離開來,分別測定其熒光強度,以內(nèi)標(biāo)為對照定量待檢測模板。
c、PCR-ELISA法
利用di高辛或生物素等標(biāo)記引物,擴增產(chǎn)物被固相板上特異的探針?biāo)Y(jié)合,再加入抗di高辛或生物素酶標(biāo)抗體-辣根過氧化物酶結(jié)合物,最終酶使底物顯色。常規(guī)的PCR-ELISA法只是定性實驗,若加入內(nèi)標(biāo),作出標(biāo)準(zhǔn)曲線,也可實現(xiàn)定量檢測目的。
植物乳桿菌培養(yǎng)基: 6模式菌株: no污泥提供形式: 凍干物安全等級: 1生長條件: 37℃ -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

 -532℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

釀酒酵母培養(yǎng)基: CM0077酒精釀造提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 28℃ -80℃冰箱凍結(jié)法

 AS1.2620=ATCC15442=DSM939=NCIMB10421測定抗菌防腐劑,紡織品的細(xì)菌耐藥性檢測,藥效試驗,質(zhì)量控制菌株。模式菌株: no種屬: Pseudomonasaeruginosa動物房水的瓶子安全等級: 1培養(yǎng)基: 2、109生長條件: 37℃

白色鏈霉菌生長條件: 28℃培養(yǎng)基: 0012提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1模式菌株: no -80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

熒光假單胞菌分類、研究,具有處理富營養(yǎng)水體和養(yǎng)殖廢水潛力。模式菌株: no土壤提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 0002生長條件: 28℃

不解糖假蒼白桿菌潛在的有機污染物降解菌/分離自十溴聯(lián)醚富集菌群模式菌株: no沉積物/表層沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 471生長條件: 28℃

哲拉什黃桿菌產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)蛋白酶菌株模式菌株: no沉積物/深灰色沉積物提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: 821生長條件: 15℃

 -533℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

傳染性法氏囊病病用于科研模式菌株: no病雞提供形式: 凍結(jié)物安全等級: 2培養(yǎng)基: 0生長條件: 37

DH5α(含pUC19質(zhì)粒)大腸桿菌培養(yǎng)基: LB培養(yǎng)基,含50μg/mL氨芐青霉素鈉。

酵母提取物 5.0 g,蛋白胨 10.0 g,NaCl 10.0 g,瓊脂 15.0 g,蒸餾水 1.0 L,pH 7.0。121℃,15min滅菌。 滅菌結(jié)束,冷卻降溫后加入氨芐青霉素鈉,使培養(yǎng)基中氨芐青霉素鈉終含量為50μg/mL。pUC19質(zhì)粒提取。提供形式: 西林瓶,菌片安全等級: 1模式菌株: no生長條件: 37℃  ,好氧 -20℃避光保存;運輸條件:常溫運輸。

ATCC19258巴氏滅菌典型株。模式菌株: no種屬: Streptococcus│thermophilus提供形式: 凍干物安全等級: 1培養(yǎng)基: CM0503生長條件: 37℃

沙福芽孢桿菌培養(yǎng)基: 33共生微生物/野生鯔魚腸道共生菌 產(chǎn)酶微生物/脂酶(三丁甘油酯)、蛋白酶、纖維素酶生物樣/野生鯔魚腸道內(nèi)容物提供形式: 凍干物模式菌株: no生長條件: 28℃ 液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法

美味牛肝菌食用菌模式菌株: no子實體提供形式: 斜面培養(yǎng)物安全等級: 1培養(yǎng)基: 150生長條件: 28-30

白色假絲酵母生長條件: 28℃安全等級: 1模式菌株: no培養(yǎng)基: 13

 -534℃冰箱凍結(jié);真空冷凍干燥

硫化鈉(陰涼)wo7ium sulfide (cool)AR500g

AAL03-1KGDL-Arginine DL-精安鹽鹽1119-34-287

CA2021-25mgAmphotericin B,solubilized 可溶性兩性霉素B1397-89-325MG

SDS-PAGE蛋白上樣緩沖液(5X)2ml

Nalidixic Acid250g

價甲酯metxyl formate色標(biāo)10ml

ER0503HindIII, HC25000 units13

GE859-1GG-418 sulfate [Geneticin]108321-42-21g

Dextran Sulfate50g

6-安基已6-aminocaproic acidBR25g

大鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白5(IGFBP-5)ELISA試劑盒 ,英文名: IGFBP-5 ELISA Kit

人抗核仁抗體(ANA)ELISA檢測試劑盒Humanai-nucleolusaibody,ANAELISAKit 96T/48T

大鼠β-防御素(β-Defensins)免疫試劑盒 Rat β-Defensins ELISA Kit

CLIAKitforSyk(Humanspleeyrosinekinase)ELISAKit人脾臟酪氨激酶規(guī)格:48T/96T

人體N-乙酰轉(zhuǎn)移酶1(NAT1)活性熒光定量檢測試劑盒20次

ELISAKitAb人抗促甲狀腺素受體抗體規(guī)格:48T/96T
沙門氏菌SPP-sdfi核酸檢測試劑盒柴胡皂苷B中文別名:柴胡皂甙B  

英文名:Saikosaponin B  

登錄號:新品待定

分子結(jié)構(gòu):

外觀:白色粉末

規(guī)格:20 mg/支

純度:≥ 98%

用途:用于含量測定/鑒定/藥理實驗等。

提取來源:傘形科植物阿爾泰柴胡Bupleurum krylovianum Schischk.ex Kryl.

溶解性:可溶于水,不溶于等有機溶劑。

藥理藥效:抗炎、抗病、抗腫瘤。

貯存條件: 4℃冷藏、密封、避光

有效期: 2年
PCR的反應(yīng)條件:
因擴增片段的大小、反應(yīng)體積、使用擴增儀器的不同而不同。
◇ 循環(huán)次數(shù)
根據(jù)模板DNA的量以及擴增片段的大小,設(shè)定25~30個循環(huán)。
如果循環(huán)次數(shù)太少,擴增量不足;如果循環(huán)次數(shù)太多,則會出現(xiàn)Smear。
◇ Anneal以及Extension
合適的Anneal溫度通常在45~68℃之間 (預(yù)備實驗可2℃間隔進行)。另外,由于在60~68℃間,也有很高的活性, 因此可在此溫度范圍內(nèi)設(shè)定Anneal-Extension溫度, 進行2 Step PCR。Anneal-Extension溫度為68℃ 時,每kbp大體可設(shè)定30秒~1分鐘;當(dāng)溫度設(shè)定在68℃以下時, 時間設(shè)定可稍長一些。通常,Anneal溫度太高,有時會得不到擴增產(chǎn)物;Anneal溫度太低時,容易發(fā)生非特異性反應(yīng)。另外,Extension時間太短時,會得不到擴增產(chǎn)物或者會有一些短的非特異性產(chǎn)物優(yōu)成;而Extension時間太長時,會出現(xiàn)Smear。

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