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| 貨號 | FS-01S63719 |
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產(chǎn)品名稱:SNP土壤中性磷酸酶檢測試劑盒微量法
規(guī)格:100管/96樣
檢測方法:微量法
貨號:FS-01S63719
商品介紹:
測定意義 土壤磷酸酶是催化土壤有機(jī)磷礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機(jī)磷的分解轉(zhuǎn)化及其生物有效性,是評價(jià)土壤磷素生物轉(zhuǎn)化方向與強(qiáng)度的指標(biāo)。磷酸酶活性受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH的顯著影響,根據(jù)最適PH范圍,一般把土壤磷酸酶分為中性、酸性和堿性三種類型。 測定原理: 中性環(huán)境中,S-NP催化磷酸苯二鈉水解生成苯和磷酸氫鈉,通過測定酚的生成量即可計(jì)算出NP活性。 自備儀器和用品: 紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機(jī)、37℃恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水、乙醇和甲苯。 |
試劑的組成和配制:
提取液:液體 100mL×1 瓶,4℃保存;
試劑一:液體 5mL×1 瓶,4℃保存;
試劑二:液體 200μL×1 支,4℃保存;
試劑三:液體 4mL×1 瓶,4℃保存;
試劑四:粉劑×2 瓶,4℃保存。
粗酶液提?。?/span>
1、細(xì)胞或組織樣品的制備: 培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)胞數(shù)量(104個(gè)):提取液體積(ml)為500~1000:1的比例(建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液),超聲波破碎細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復(fù)30次);8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。組織:按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(ml)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1ml提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。 2、血清(漿)樣品:直接檢測。 |
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量,如樣品濃度過高時(shí),應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。 1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。 2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。 3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 4. 每孔加檢測溶液B工作液(同檢測A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。 5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。 6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。 7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。 8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。 |
大鼠白介20(IL-20)試劑盒Human CHPT1 (Cholinephosphotransferase 1) ELISA KIT磷化粘著斑激抗體
大鼠白活化黏附因子(ALCAM)試劑盒 Human CHKB (Choline/ethanolamine kinase) ELISA KIT磷化粘著斑激抗體
大鼠胰淀(IAPP)試劑盒 Human DAB1(Disabled homolog 1) ELISA Kit下頜發(fā)育不良綜合征相關(guān)蛋白FAKD3抗體
大鼠血管生成樣蛋白3(ANGPTL3)試劑盒 Human CENPT (Centromere protein T) ELISA KITFAM134B蛋白抗體
大鼠髓鞘相關(guān)糖蛋白(MAG)試劑盒 Human CDCA7L (Cell division cycle-associated 7-like protein) ELISA KIT磷化范可尼貧血組蛋白A抗體
大鼠胎球蛋白A(FETUA)試劑盒 Human CGREF1 (Cell growth regulator with EF hand domain protein 1) ELISA KIT范可尼綜合征相關(guān)蛋白FANCC抗體
大鼠Dickkopf相關(guān)蛋白3(DKK3)試劑盒Human CHKA (Choline kinase alpha) ELISA KITFXYD離子轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)節(jié)因子6抗體
大鼠血管緊張轉(zhuǎn)化2(ACE2)試劑盒 Human CHKB (Choline/ethanolamine kinase) ELISA KITFyn結(jié)合蛋白抗體
大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGE)試劑盒 Human CHPT1 (Cholinephosphotransferase 1) ELISA KIT鋅指蛋白FYCO1抗體
大鼠胰島降解(IDE)試劑盒Human CNTLN (Centlein) ELISA KITFYTTD1蛋白抗體
大鼠*(CAT)ELISA kitHuman CHRM1 (Muscarinic acetylcholine receptor M1) ELISA KITRNA結(jié)合蛋白9抗體
大鼠總膽汁(TBA)試劑盒 Human CENPT (Centromere protein T) ELISA KIT巖藻糖轉(zhuǎn)移11抗體
大鼠新蝶呤 (Neopterin)試劑盒 Human CENPV (Centromere protein V) ELISA KIT干擾誘導(dǎo)蛋白15抗體
大鼠CD4分子(CD4)試劑盒Human ABCA1(ATP-binding cassette sub-family A member 1) ELISA KitP38相互作用蛋白抗體
大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)試劑盒 Human CHEK1 (Serine/threonine-protein kinase Chk1) ELISA KIT鈣粘樣蛋白28抗體
SNP土壤中性磷酸酶檢測試劑盒微量法血小板衍化生長因子γ抗體Anti-AK2 Antibody(原貨號PB1089)大鼠抗IVIgG抗體elisa檢測試劑盒品牌
血小板47蛋白抗體Anti-AKAP12 Antibody大鼠抑制Aelisa檢測試劑盒說明書
相關(guān)血漿蛋白A2抗體Anti-AK1 Antibody大鼠脫氫表雄酮elisa檢測試劑盒說明書
血漿谷羧肽抗體Anti-AKR1C1/C2 Antibody大鼠降鈣基因相關(guān)肽elisa檢測試劑盒品牌
磷化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-AKR1B10 Antibody大鼠Aelisa檢測試劑盒品牌
撲克蒙蛋白抗體Anti-AKR1B1 Antibody大鼠K1elisa檢測試劑盒說明書
癌易感基因相關(guān)蛋白2Anti-AKR1D1 Antibody大鼠大內(nèi)皮elisa檢測試劑盒說明書
細(xì)小清蛋白抗體Anti-AKR1D1 Antibody大鼠血栓前體蛋白elisa檢測試劑盒說明書
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