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當(dāng)前位置:上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>>小鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理>> 48T/96TPⅢNP小鼠Ⅲ型前膠原肽ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
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公司“質(zhì)量是企業(yè)是生命之源”,選購(gòu)優(yōu)勢(shì)如下:
1*抗體——、靈敏、特異
2操作——吸附均勻、吸附性好、空白值低、空底透明度高
3的優(yōu)化方案——回收利用率高、可靠性強(qiáng)
4適用于體液、組織勻漿,細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等各種類型的樣本。
5可檢測(cè)指標(biāo)齊全:生長(zhǎng)因子、炎癥因子、脂肪因子、基質(zhì)金屬蛋白酶等等
產(chǎn)品名稱 | PⅢNP小鼠Ⅲ型前膠原肽ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理 |
英文名稱 | Mouse N-terminal procollagen Ⅲ propeptide, PⅢNP Elisa Kit |
貨號(hào) | FS-M64385 |
公司產(chǎn)品僅用于科研ELISA方法被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測(cè)定。 但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在檢測(cè)過(guò)程中除正常反應(yīng)外,有時(shí)常見(jiàn)到一些錯(cuò)誤的結(jié)果。
引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:
①標(biāo)本因素;
②試劑因素;
③操作因素。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中請(qǐng)嚴(yán)格按照使用說(shuō)明操作,必能得出準(zhǔn)確的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,可提供免費(fèi)技術(shù)咨詢服務(wù)!
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樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:
ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。
(1)血清
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(2)血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(3)尿液:
用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
(4)細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
(5)培養(yǎng)細(xì)胞
檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
(6)組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
操作流程:
(1)待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl,每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔;設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過(guò)夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過(guò)洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最終測(cè)得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對(duì)照(N)的 OD值后,計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)
真核翻譯起始因子2C4抗體英文全稱NADHcytochrome b5 reductase英文簡(jiǎn)稱b5R檢測(cè)范圍164nmol/L-8ng/mL
Rho GTP酶激活蛋白15抗體英文全稱NOD-1英文簡(jiǎn)稱NOD-1檢測(cè)范圍165nmol/L-8ng/mL
抑癌基因結(jié)合蛋白ARID1B抗體英文全稱NOD-2英文簡(jiǎn)稱NOD-2檢測(cè)范圍166nmol/L-8ng/mL
E3連接酶蛋白ARIH2抗體英文全稱OX40 Ligand英文簡(jiǎn)稱OX40L檢測(cè)范圍167nmol/L-800pg/L
ADP核糖基化樣因子1抗體英文全稱P21 WAF1;CIP1英文簡(jiǎn)稱P21 WAF1;CIP1檢測(cè)范圍168nmol/L-4800pg/mL
ADP核糖基化因子樣蛋白4抗體英文全稱P53-Ab英文簡(jiǎn)稱P53-Ab檢測(cè)范圍169nmol/L-8ng/mL
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3抗體英文全稱Progranulin英文簡(jiǎn)稱PGRN檢測(cè)范圍170nmol/L-1200pg/mL
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型2抗體英文全稱181P-tau英文簡(jiǎn)稱181P-tau檢測(cè)范圍171nmol/L-12pg/mL
肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白2/3亞型4抗體英文全稱Rho-associated coiled-coil containing protein kinase 5英文簡(jiǎn)稱Rock-5檢測(cè)范圍172nmol/L-48ng/mL
芳香基硫酸酯酶家族蛋白1抗體英文全稱RNA binding motif protein 6英文簡(jiǎn)稱RBM6檢測(cè)范圍173nmol/L-480pg/mL
精神分裂癥與犰狳重復(fù)基因抗體英文全稱S100A11英文簡(jiǎn)稱S100A11檢測(cè)范圍174nmol/L-4000pg/mL
乙醛脫氫酶1型抗體英文全稱S100A14英文簡(jiǎn)稱S100A14檢測(cè)范圍175nmol/L-4000pg/mL
磷酸化脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體英文全稱Soluble protein-100英文簡(jiǎn)稱S-100檢測(cè)范圍176nmol/L-480pg/mL
磷酸化活化轉(zhuǎn)錄因子1抗體英文全稱Salusin α英文簡(jiǎn)稱Salusinα檢測(cè)范圍177nmol/L-240ng/mL
磷酸化活化復(fù)制因子2抗體英文全稱SAX1英文簡(jiǎn)稱SAX1檢測(cè)范圍178nmol/L-1200pg/mL
活化轉(zhuǎn)錄因子5抗體英文全稱Sestrin 2英文簡(jiǎn)稱SESN2檢測(cè)范圍179nmol/L-8ng/mL
N8亞型(AIV-N8)核酸檢測(cè)試劑盒)Phospho-Akt Isoform Antibody Sampler Kit100 ug
偽狂犬病通用型(PRV-gB)核酸檢測(cè)試劑盒)Jak2 Blocking Peptide100 ul
豬圓環(huán)病通用型(PCV-U)核酸檢測(cè)試劑盒)Bim (C34C5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)100 ul
豬細(xì)小病(PPV)核酸檢測(cè)試劑盒)GITR (D5V7P) Rabbit mAb100 ul
丹桿菌(SER)核酸檢測(cè)試劑盒)HDAC6 (D2E5) Rabbit mAb (PE Conjugate)100 ul
豬多殺性巴氏桿菌(SPA)核酸檢測(cè)試劑盒)CYP17A1 (E6Y3S) Rabbit mAb100 ug
弓形蟲(chóng)(TOX)核酸檢測(cè)試劑盒)Cyclin D1 Blocking Peptide100 ul
豬肺炎支原體(MHP)核酸檢測(cè)試劑盒)Kindlin-3 (D8I7V) Rabbit mAb100 ug
PⅢNP小鼠Ⅲ型前膠原肽ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理效應(yīng)蛋白酶受體1抗體Methyl pseudolara A別名: 分子式: C23H30O6性狀: Oil純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 金錢松;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
早期內(nèi)吞體相關(guān)蛋白1抗體Rosenonolactone別名: 分子式: C20H28O3性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
胞吞調(diào)控蛋白Eps15抗體13-O-Deacetyltaxumairol Z別名: 分子式: C31H40O12性狀: Powder純度: 特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 紅豆杉;紫杉烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
真核翻譯起始因子4E抗體Baccatin IV別名: 分子式: C32H44O14性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 紅豆杉;紫杉烷;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
核輸出蛋白5抗體12-Hydroxyabietic acid別名: 12-Hydroxy-7,13-abietadien-18-oic acid分子式: C20H30O3性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 長(zhǎng)白松;馬尾松;冷杉屬;松香烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
腸致病性大腸桿菌抗體Baccatin VIII別名: 9-Dihydro-14-hydroxy-13-O-acetylbaccatin III分子式: C33H42O13性狀: Powder純度: 97.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 紅豆杉;紫杉烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
E4F轉(zhuǎn)錄因子1抗體Pseudolaric acid D別名: ent-18-Hydroxy-15-kauren-17-oic acid分子式: C20H30O3性狀: Powder純度: 98.5%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 貝殼杉烷;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
睪調(diào)節(jié)凋亡誘導(dǎo)和腫瘤抑制基因抗體19-Hydroxybaccatin III別名: 分子式: C31H38O12性狀: Powder純度: 98.0%特色服務(wù): 隨貨提供1H-NMR等報(bào)告關(guān)鍵詞: 抗腫瘤;抗癌;紅豆杉;紫杉烷;中藥對(duì)照品;中藥標(biāo)準(zhǔn)品;植物提取物;天然產(chǎn)物;天然產(chǎn)物庫(kù)
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