產(chǎn)品介紹:

中文名稱：CDK4和CDK6抑制劑(LEE011)

英文名稱：LEE011

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

貨號(hào)：FS-X10335

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細(xì)胞100μL/孔，通常細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升2000個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)每孔加入100微升5000～10000個(gè)細(xì)胞（具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目，需根據(jù)細(xì)胞的大小，細(xì)胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時(shí).

2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時(shí)間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時(shí)，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標(biāo)儀在570nm 波長(zhǎng)處檢測(cè)每孔的光密度（如無(wú)570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結(jié)果分析

a、細(xì)胞的存活率：將各測(cè)試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無(wú)細(xì)胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無(wú)細(xì)胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細(xì)胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細(xì)胞的OD 值，C 為對(duì)照細(xì)胞的OD 值。細(xì)胞存活率% =（加藥細(xì)胞OD/對(duì)照細(xì)胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時(shí)的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時(shí)的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)；

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。

褐粘褶菌微小染色體維持缺陷蛋白3抗體Human NEDD4L 皮質(zhì)抑/皮質(zhì)穩(wěn)定蛋白(CORT)

Marella endophytica基質(zhì)金屬蛋白-26抗體Human HK1(Hexokinase-1) 皮質(zhì)/腎上腺(CORT)

堅(jiān)強(qiáng)芽孢桿菌絲裂原活化蛋白激激4抗體Human NEK3 皮質(zhì)(CORT)

白僵菌MYOZ抗體Human NEK11 皮質(zhì)-3(Cortxin-3)

毛柄金錢菌(金針菇)單核趨化蛋白2抗體Human NDUFS1 皮質(zhì)類固結(jié)合球蛋白(CBG)

黃曲霉甲基化樣蛋白11抗體（N端）Human NEK9 皮質(zhì)(Cortisol)

大雙歧桿菌大腸癌腫瘤突變蛋白抗體Human NDUFS3 皮膚淋巴相關(guān)抗原(CLA)

彩色豆馬勃絲/蘇蛋白激MARK4抗體Human NELF 皮膚蛋白(DPT)

多變毛霉甲肽水解抗體Human NDUFS5 皮膚T虜獲趨化因子(CTACK/CCL27)

假單胞菌磷化絲裂原活化蛋白激激2抗體Human NDUFS6 皮動(dòng)蛋白(CTTN)

溜曲霉磷化絲裂原活化蛋白激激3抗體Human FOXO3(Forkhead box protein O3) 胚胎性硫糖蛋白抗原(FSA)

粘性放線菌絲裂原活化蛋白激激5抗體Human NDUFV1 泡狀過(guò)表達(dá)癌癥促生存蛋白1(VOPP1/ECOP/GASP)

戈壁發(fā)鏈霉菌磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體Human XDH(Xanthine dehydrogenase/oxidase) 膀胱腫瘤抗原(BTA)

黑曲霉磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體Human MYBBP1A(Myb-binding protein 1A) 膀胱癌抗原(UBC)

鏈格孢磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體Human TLR4(Toll-like receptor 4) 排序連接蛋白3(SNX3)

總狀共頭霉磷化絲裂原活化蛋白激激5抗體Human MYBPC1 帕金森氏病2Parkin(Park2)

黑曲霉Aspergillus│niger 質(zhì)量規(guī)格：>99%,分子生物學(xué)級(jí)；紫杉

大腸埃希菌Escherichia│coli 質(zhì)量規(guī)格：>99%,進(jìn)分sigma

堅(jiān)強(qiáng)芽胞桿菌Bacillus│firmus 質(zhì)量規(guī)格：>98%芝麻林
CDK4和CDK6抑制劑(LEE011)香菇 2-溴苯硫抵抗

香氣紅冬孢鎖擲孢酵母 2--6-甲抵抗樣分子α

根瘤 2,4,6-三苯甲淀粉

馬氏副球 4-芐基苯淀粉樣前體蛋白

谷棒桿 3,5-二苯凋亡相關(guān)因子

中國(guó)臺(tái)灣根霉 3,4-二苯甲凋亡相關(guān)因子配體

根瘤 二硫烷凋亡誘導(dǎo)因子

孟加拉副球 2,4-二苯丁酰酯

茄鏈格孢 2,3-二苯蕈堿型乙酰受體

鼠李糖乳桿 2-雙環(huán)己基膦-2',6'-二甲氧基聯(lián)苯端粒

奇異酵母 4--3-三氟甲基芐對(duì)苯

植物乳桿 L-賴對(duì)氧磷1

假單胞屬 4-溴-3-氟苯多巴

裂褶 2,3,4,6-四-O-芐基-alpha-D-吡喃葡萄糖多巴D1受體

產(chǎn)二鏈霉 4-氟鄰苯二多巴D2受體