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| 產(chǎn)地 | 國產(chǎn) | 加工定制 | 是 |
|---|---|---|---|
| 適用領域 | 科研 | 貨號 | FS-01X9874 |

產(chǎn)品屬于:
產(chǎn)品名稱:T淋巴細胞
產(chǎn)品規(guī)格:1×106
貨號:FS-01X9874
產(chǎn)品類型:原代細胞
單位:T25/瓶
提供細胞鑒定:提供免疫熒光鑒定報告
保存培養(yǎng)溫度(℃):37
運輸溫度(℃):常溫
細胞培養(yǎng)的優(yōu)點:
1.研究的對象是活細胞 在實驗過程中,根據(jù)要求可始終保持細胞活力,并可長時間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細胞的情況,包括活細胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。 2.研究條件可以人為控制 pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學的條件,可以根據(jù)實際需要進行人為的控制,同時,可以施加化學、物理、生物等因素作為條件而進行實驗觀察,這些因素同樣可以處于嚴格控制之下。 3.研究的樣本可以達到比較均一性 通過細胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細胞系則可以達到均一性而屬于同一類型的細胞,需要時,可采用克隆化等方法使細胞達到純化。 4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄 采用各種研究技術:如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細胞術、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學、原位雜交、同位素標記等各種儀器設備。 |
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
注意事項:
1. 接收到細胞,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。 2.用75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。 3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。 4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。 5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。 6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。 7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。 |
實驗報告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大小;
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;
2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;
5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
雞熱休克蛋白60(Hsp-60)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken Heat Shock Protein 60,HSP-60 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
雞17羥皮質(zhì)類固(17-OHCS)ELISA試劑盒英文名稱:Hydroxycorticosteroids,17-OHCS ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
雞白介4(IL-4)ELISA試劑盒 英文名稱:Chicken Interleukin 4,IL-4 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
雞白介2(IL-2)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken Interleukin 2,IL-2 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
雞一氧化氮(NO)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken nitric oxide,NO ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
雞單純皰疹病毒Ⅱ型抗體(HSVⅡ-Ab)ELISA試劑盒 英文名稱:Chicken Herpes simplexvirus Ⅱ antibody,HSVⅡ-Ab ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
雞補體3裂解產(chǎn)物(C3SP)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken Complement 3 split product,C3SP ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
雞腎上腺髓質(zhì)(ADM)ELISA試劑盒 英文名稱:Chicken adrenomedullin,ADM ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
雞巨噬細胞替代激活相關化學因子1(AmAC-1)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken Alternative macrophage activation-associated CC chemokine 1,AmAC-1 ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
雞免疫核糖核(Irna)ELISA試劑盒 英文名稱:Chicken Immune RNA,Irna ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
雞β內(nèi)酰(β-lactamase)ELISA試劑盒 英文名稱:Chicken β-lactamase ELISA Kit規(guī)格:96T/48T
雞流行性乙型腦炎抗體IgG(JE IgG)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken Japanese Encephalitis IgG,JE IgG ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
雞α葡萄糖(a-Glu)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken α-Glucosidase,a-Glu ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
雞血小板因子4(PF-4/CXCL4)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken Platelet Factor 4,PF-4 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
雞腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體3(TRAIL-R3)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand 3,TRAIL-R3 ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
雞L苯解(PAL)ELISA試劑盒 英文名稱:Chicken L-Phenylalanine ammonla-lyase,PAL ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
雞煙酰腺二核磷(NADPH)ELISA試劑盒 英文名稱:Chicken nicotinamide adenine dinucleotide phosphate,NADPH ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
雞B因子(BF)ELISA試劑盒英文名稱:Chicken factor B,BF ELISA Kit 規(guī)格:96T/48T
T淋巴細胞PLK5 /蛋白激5抗體規(guī)格: 0.2ml
phospho-MST1R(Tyr1353) 磷化原癌基因c-Met相關酪抗體規(guī)格: 0.1ml
MAPK13/SAPK4/p38delta 絲裂原活化蛋白激13抗體規(guī)格: 0.2ml
Robo2 軸突導向受體蛋白2抗體規(guī)格: 0.1ml
SKAR DNA聚合δ相互作用蛋白3抗體規(guī)格: 0.2ml
SRPK2 /蛋白激SRPK2抗體規(guī)格: 0.2ml
TBRG4 轉(zhuǎn)化生長因子β調(diào)節(jié)蛋白4抗體規(guī)格: 0.2ml
TLK2 /蘇TLK2抗體規(guī)格: 0.2ml
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