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貨號	FS-X9837

產品介紹:

Rhodamine 123染色液可用于細胞凋亡檢測，Rhodamine 123 是一種細胞通透性的、陽離子的熒光探針，容易被有活性的線粒體攝取，沒有細胞毒性，Rhodamine 123由于帶陽離子所以當線粒體膜電位存在的時候就會透過細胞膜在活細胞的線粒體內聚集，發(fā)出黃綠色熒光，而當膜電位下降的時候，聚集的Rhodamine 123 就減少，從而發(fā)光強度降低。

Rhodamine 123 常與Cy5和AMCA (Aminomethylcoumarin Acetate)等組合進行多色熒光分析,相互間無顏色交叉;分析細胞凋亡時,可用Rhodamine 123 來檢測線粒體的膜電位,而用NAO 來檢測線粒體結構的完整性。Rhodamine 123，可用于對許多種細胞進行染色，包括植物細胞和細菌。由于細胞內ATP的量與Rhodamine 123的熒光強度之間有相關性，Rhodamine也可應用于檢測細胞內的ATP。

儲存條件：4℃避光保存。長期保存-20℃避光保存。

有效期：六個月。

中文名稱：Rhodamine 123染色液

英文名稱：

產品規(guī)格：100T

貨號：FS-X9837

實驗報告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；

二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

操作規(guī)程

1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.

2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。

3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。

4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。

5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。

6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。

7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。

8、結果分析

a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100

b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)

培養(yǎng)操作步驟：

1．公司僅用于科研用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布；

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）；

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時；

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中；

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及免疫細胞化學檢測。

英文名： Cyclosporine A磷化原癌基因c-kit抗體包裝5g

拓撲替康鹽鹽英文名： Ticlopidine HCl磷化原癌基因c-kit抗體包裝5g

維酰酚英文名： Ticlopidine HCl胸腺基質淋巴生成受體抗體包裝25g

維羅非尼,RG7204英文名： Cytarabine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝5g

戊柔比星英文名： Cytarabine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g

西地尼布;AZD2171英文名： Cytarabine蛋白磷激PKC/CPI-17抗體包裝5g

西地尼布馬來鹽英文名： Dacarbazine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g

亞葉鈣英文名： Dacarbazine磷化非受體酪激c-Abl抗體包裝1g

鹽阿糖胞英文名： Dasatinib胰輔脂抗體包裝5g

鹽埃羅替尼英文名： Dasatinib19號染色體開放閱讀框45抗體包裝5MG

鹽昂丹司瓊英文名： Daptomycin*誘導轉錄蛋白1抗體包裝5MG

鹽達莫司汀英文名： Daptomycin核因子NFκB激活蛋白1抗體包裝100g

鹽表阿霉英文名： Daunorubicin HCl第12號染色體開放閱讀框23抗體包裝25g

鹽/鹽阿霉英文名： Daunorubicin HClγ-連環(huán)/連接蛋白γ抗體包裝5g

鹽英文名： Daunorubicin HCl10號染色體開放閱讀框4抗體包裝100g

鏈霉菌屬Streptomyces│sp. 質量規(guī)格：含量測定胰島受體底物2試劑盒鹽拓撲替康;Topotecan hyd

膠孢Glomerella│cingulata (Stoneman) Spauld. & H. Schrenk 質量規(guī)格：>99.0%胰島受體底物1試劑盒延齡草;Diosgenin gluco

小珊瑚球菌Corallococcus│exiguus 質量規(guī)格：HPLC>99.0%,標準品胰島受體β試劑盒異槲皮;Isoquercitrin
Rhodamine 123染色液山羊葡萄球新生牛血清500ml/XQ-A0500磷化信號轉導分子SMAD-2

克魯斯假絲酵母新生牛血清100ml/XQ-A0100磷化信號轉導分子SMAD-7

泡盛曲霉新生牛血清50ml/XQ-A0050核糖基轉移1

薄層穩(wěn)定劑，500ml裝/CT-0500脂聯(lián)β樣1

釀酒酵母穩(wěn)定劑，200ml裝/CT-0200胰島抗體

穩(wěn)定劑，50ml裝/CT-0050神經調節(jié)蛋白4

仙芝(靈芝屬之一種) 穩(wěn)定劑，10ml裝/CT-0010血管緊張轉化1

香菇蛋白/穩(wěn)定劑/PS-050血管緊張轉化1

嗜鹽細屬蛋白/穩(wěn)定劑/PS-010流行性出血熱IgG抗體

短小克銀漢霉蛋白/穩(wěn)定劑/PS-00115-deoxy-前列腺J2

傷門氏粘附液/301-026-015抗能受體M2抗體

干草鞘氨單胞粘附液/301-025-015CD64分子

黃桿蛋白膠染液 /300-692-1000磷乙磷

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