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貨號	FS-01S63232

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公司產(chǎn)品僅用于科研提供的生化試劑盒，質(zhì)量信得過產(chǎn)品，售后*。服務(wù)于高校及免疫學(xué)科研單位，竭誠為您提供更周到的服務(wù)更優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品。

產(chǎn)品名稱：MDHAR單脫氫抗壞血酸還原酶微量法

規(guī)格：100管/96樣

檢測方法：微量法

貨號：FS-01S63232

商品介紹：

測定意義

MDHAR催化MDHA還原生成AsA，在抗壞血酸氧化還原代謝中具有重要作用。

測定原理：

MDHAR 催化 NADH 還原MDHA 生成 AsA和NAD+，NADH在340 nm有特征吸收峰，但是NAD+沒有。通過測定340 nm光吸收下降速率，來計(jì)算出MDHAR活性。

實(shí)驗(yàn)中所需儀器及設(shè)備：

研缽、冰、臺(tái)式離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍和雙蒸水

操作步驟:

實(shí)驗(yàn)開始前，各試劑均應(yīng)平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測樣品含量，如樣品濃度過高時(shí)，應(yīng)對樣品進(jìn)行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。

1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。

2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。

3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。

5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。

6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。

7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。

8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后立即進(jìn)行檢測。

粗酶液提取：

1、細(xì)胞或組織樣品的制備：

培養(yǎng)細(xì)胞：先收集細(xì)胞到離心管內(nèi)，離心后棄上清；按照細(xì)胞數(shù)量（104個(gè)）：提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細(xì)胞加入1ml提取液），超聲波破碎細(xì)胞（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復(fù)30次）；8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(ml)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1ml提取液），進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

試劑的組成和配制：
提取液：液體 100mL×1 瓶，4℃保存；

試劑一：液體 5mL×1 瓶，4℃保存；

試劑二：液體 200μL×1 支，4℃保存；

試劑三：液體 4mL×1 瓶，4℃保存；

試劑四：粉劑×2 瓶，4℃保存。
豬去精加壓(dDAVP)試劑盒 Human Appbp2(Amyloid protein-binding protein 2) ELISA Kit胚胎干相關(guān)蛋白FOPNL抗體

豬衰變加速因子(DAF)試劑盒 Human ANAPC2 (Anaphase-promoting complex subunit 2) ELISA KIT磷化癌基因FOS蛋白B抗體

豬芳基硫酯A(ARSA)試劑盒 Human ANK1(Ankyrin-1) ELISA Kit叉頭蛋白D2抗體

豬趨化因子CX3C受體1(CX3XR1)試劑盒Human ANLN (Actin-binding protein anillin) ELISA KIT叉頭蛋白E3抗體

豬鳥苷激1(GUK1)試劑盒 Human ANKFY1 (Rabankyrin-5) ELISA KIT叉頭蛋白F2抗體

豬脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)試劑盒 Human Appbp2(Amyloid protein-binding protein 2) ELISA Kit叉頭蛋白H1抗體

豬熱休克蛋白27(HSP-27/HSPB1)試劑盒 Human ANAPC2 (Anaphase-promoting complex subunit 2) ELISA KIT叉頭蛋白I1抗體

豬磷肌-3-激2α肽(PI3K2α)試劑盒Human AIF1L (Allograft inflammatory factor 1-like) ELISA KIT磷化叉頭蛋白4抗體

豬甲狀旁腺受體2(PTHR2)試劑盒Human AAGAB (Alpha- and gamma-adaptin-binding protein p34) ELISA KIT單跨膜蛋白FOXRED1抗體

豬顆粒體蛋白(GRN)試劑盒Human AGPS (Alkyldihydroxyacetonephosphate synthase, peroxisomal) ELISA KITFOXRED2蛋白抗體

豬GATA結(jié)合蛋白5(GATA5)試劑盒Human ADRB2 (Beta-2 adrenergic receptor) ELISA KIT巖藻糖1磷鳥苷酰轉(zhuǎn)移抗體

豬酪羥化(TH)試劑盒 Human ALMS1 (Alstrom syndrome protein 1) ELISA KIT外基質(zhì)蛋白FREM1抗體

豬血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒 Human ADRA1D (Alpha-1D adrenergic receptor) ELISA KIT原癌基因FRAT1抗體

豬胚外胚層發(fā)育蛋白(EED)試劑盒Human AMER1 (APC membrane recruitment protein 1) ELISA KIT叉頭蛋白D1抗體

豬著絲粒蛋白F(CENPF)試劑盒 Human AMBN (Ameloblastin) ELISA KIT11重鏈抗體
MDHAR單脫氫抗壞血酸還原酶微量法乙型肝炎e抗原Anti-LPAR5 Antibody小鼠肝癌衍生生長因子（HDGF）elisa定量檢測試劑盒

乙型肝炎e抗體Anti-LRG1 Antibody小鼠胰島樣生長因子結(jié)合蛋白4（IGFBP-4）elisa定量檢測試劑盒

乙型肝炎核心抗體Anti-LPCAT2 Antibody小鼠巨噬移動(dòng)抑制因子（MIF）elisa定量檢測試劑盒

乙型肝炎核心抗體 IgMAnti-LRP10 Antibody小鼠神經(jīng)絲蛋白（NF）elisa定量檢測試劑盒

促黃體生成Anti-LRP10 Antibody小鼠基質(zhì)金屬蛋白原-9（Pro-MMP-9）elisa定量檢測試劑盒

促卵泡生成Anti-LRP3 Antibody小鼠核因子κB受體活化因子配基（RANκL）elisa定量檢測試劑盒

催乳Anti-LRP11 Antibody小鼠白介12（IL-12）elisa定量檢測試劑盒

孕酮Anti-LRRC41 Antibody小鼠白介13（IL-13）elisa定量檢測試劑盒

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