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脂肪測(cè)定儀普遍依據(jù)索氏提取原理設(shè)計(jì),是檢測(cè)食品、油料、飼料、谷物等樣品粗脂肪含量的經(jīng)典分析設(shè)備,依靠有機(jī)溶劑對(duì)油脂的溶解特性完成脂肪分離與定量檢測(cè),整套流程分為浸潤(rùn)提取、溶劑回流、溶劑回收、烘干稱重四大階段。
索氏提取法核心理論依據(jù)為相似相溶原理。脂肪屬于脂溶性有機(jī)物,不溶于水,但能夠被石油醚、正己烷等非極性有機(jī)溶劑充分溶解。樣品內(nèi)部結(jié)合態(tài)、游離態(tài)脂肪,在持續(xù)加熱、溶劑浸潤(rùn)條件下,與溶劑充分接觸形成脂肪溶液;利用溶劑沸點(diǎn)較低的特性,通過(guò)加熱實(shí)現(xiàn)溶劑汽化、冷凝循環(huán),持續(xù)不斷對(duì)樣品進(jìn)行浸提,將樣品中絕大部分粗脂肪轉(zhuǎn)移至有機(jī)溶劑中,后續(xù)去除溶劑后稱量殘余物質(zhì)質(zhì)量,即可計(jì)算樣品粗脂肪含量。
脂肪測(cè)定儀設(shè)備主要組成包含加熱單元、提取杯、抽提筒、冷凝裝置、溶劑回收管路。工作啟動(dòng)后,加熱模塊對(duì)提取杯內(nèi)有機(jī)溶劑加溫,溶劑受熱汽化上升,抵達(dá)上部冷凝管,冷卻水持續(xù)循環(huán)使氣態(tài)溶劑冷卻液化,液態(tài)溶劑不斷滴入裝有樣品濾紙筒的抽提筒內(nèi),浸泡樣品。溶劑浸沒(méi)樣品后,持續(xù)溶出樣品中的粗脂肪。當(dāng)抽提筒內(nèi)液面達(dá)到溢流高度時(shí),溶有脂肪的混合溶劑依靠虹吸作用全部回流至下方提取杯。
虹吸回流完成一輪提取循環(huán),溶劑再次受熱汽化,重復(fù)冷凝、浸泡、虹吸流程。循環(huán)往復(fù)的過(guò)程,相當(dāng)于新鮮溶劑持續(xù)萃取樣品,相比靜態(tài)浸泡提取效率大幅提升。隨著循環(huán)持續(xù)進(jìn)行,提取杯內(nèi)脂肪濃度不斷升高,樣品中的脂肪持續(xù)被轉(zhuǎn)移出來(lái)。設(shè)定的提取時(shí)長(zhǎng)結(jié)束后,停止加熱,進(jìn)入預(yù)干燥與溶劑回收階段。設(shè)備通過(guò)管路回收大部分有機(jī)溶劑,實(shí)現(xiàn)溶劑重復(fù)利用,降低實(shí)驗(yàn)成本同時(shí)減少有機(jī)溶劑揮發(fā)帶來(lái)的安全隱患。
提取完成后取出含有脂肪的提取杯,放入烘箱烘干,除去杯內(nèi)殘留溶劑,冷卻至室溫后精準(zhǔn)稱重。根據(jù)提取杯提取前后的質(zhì)量差值,得到樣品中粗脂肪質(zhì)量,結(jié)合樣品取樣重量,通過(guò)公式計(jì)算粗脂肪百分含量。該方法檢測(cè)得到的物質(zhì)統(tǒng)稱為粗脂肪,除甘油三酯以外,還包含磷脂、蠟質(zhì)、色素等可溶于有機(jī)溶劑的脂類物質(zhì)。
現(xiàn)代全自動(dòng)脂肪測(cè)定儀在傳統(tǒng)索氏裝置基礎(chǔ)上增加多種模式,可實(shí)現(xiàn)靜態(tài)浸提、連續(xù)提取、索氏循環(huán)提取多種模式切換。儀器增設(shè)溫度精準(zhǔn)控制系統(tǒng),嚴(yán)格控制溶劑加熱溫度,避免溶劑過(guò)熱暴沸,同時(shí)規(guī)避溶劑高溫帶來(lái)的起火風(fēng)險(xiǎn)。部分機(jī)型帶有密閉回收系統(tǒng),減少有機(jī)溶劑向?qū)嶒?yàn)室環(huán)境擴(kuò)散,改善實(shí)驗(yàn)環(huán)境,契合實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范。
該檢測(cè)方法優(yōu)勢(shì)突出,提取充分、檢測(cè)結(jié)果穩(wěn)定性高,長(zhǎng)久以來(lái)作為行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法,廣泛應(yīng)用糧油加工、畜禽飼料、食品加工、農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)檢領(lǐng)域。但實(shí)驗(yàn)過(guò)程需要嚴(yán)格管控溫度、提取時(shí)長(zhǎng)、溶劑純度、樣品粉碎粒度。樣品粉碎不足會(huì)造成脂肪被組織包裹,溶劑難以滲透,最終檢測(cè)數(shù)值偏低;提取時(shí)間不足會(huì)導(dǎo)致萃取不全;烘干環(huán)節(jié)溫度過(guò)高則容易造成脂肪氧化,帶來(lái)檢測(cè)誤差。因此操作時(shí)需要嚴(yán)格遵循標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)流程,控制各項(xiàng)參數(shù),保障檢測(cè)數(shù)據(jù)準(zhǔn)確可靠。
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