(1)要留心避免出現(xiàn)嚴(yán)峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團(tuán),其有類似過氧化物的活性,因而,在以HRP為符號酶的ELISA試劑盒測定中,如血清標(biāo)本中血紅蛋白濃度較高,則其就很簡單在溫育進(jìn)程中吸附于固相,然后與后邊參與的HRP底物反響顯色。
(2)樣本的收集及血清別離中要留心盡量避免細(xì)菌污染,一則細(xì)菌的成長,其所分泌的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)作分化效果;二則一些細(xì)菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶本身會對用相應(yīng)酶作符號的測定方法發(fā)作非特異性攪擾。
(3)血清標(biāo)本如是以無菌操作別離,則可以在2~8℃下保存一周,ELISA試劑盒如為有菌操作,則建議冰凍保存。樣本的長期保存,應(yīng)在-70℃以下。
(4)冰凍保存的血清標(biāo)本須留心避免因停電等形成的重復(fù)凍融。ELISA試劑盒標(biāo)本的重復(fù)凍融所發(fā)作的機(jī)械剪切力將對標(biāo)本中的蛋白等分子發(fā)作損壞效果,然后引起假陰性效果。此外,凍融標(biāo)本的混勻亦應(yīng)留心,不要進(jìn)行劇烈振動,重復(fù)倒置混勻即可。
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