在體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中模擬出組織或體內(nèi)復(fù)雜環(huán)境下的代謝和生理反應(yīng)，一直是科研工作者的愿望，因?yàn)檫@樣可以在節(jié)約成本的同時(shí)得到更可靠的數(shù)據(jù)。如果培養(yǎng)條件可以動(dòng)態(tài)的產(chǎn)生濃度梯度，并具有自我更新能力，便可以達(dá)到此要求。SciFlow™ 1000流體培養(yǎng)系統(tǒng)外觀為標(biāo)準(zhǔn)的多孔板，它具有8條獨(dú)立的流體通道，不需要外加的泵或其他管路的幫助，通過自身特殊設(shè)計(jì)的孔間的高度差產(chǎn)生流體動(dòng)力及濃度梯度，是一款操作更簡單的流體動(dòng)力培養(yǎng)系統(tǒng)。聯(lián)合使用ImageXpress Micro高內(nèi)涵成像系統(tǒng)，得利于ImageXpress Micro*的板型設(shè)置能力，自動(dòng)調(diào)整聚焦面以適應(yīng)流體板孔間高度差異，從而實(shí)現(xiàn)實(shí)時(shí)觀測藥物對(duì)細(xì)胞的影響。
高內(nèi)涵系統(tǒng)設(shè)置自動(dòng)聚焦
將SciFlow 1000板子每孔均種上HepG2細(xì)胞，用Hoechst染料染細(xì)胞核。通過ImageXpress Micro XLS板底厚度測量功能測出每孔間Z軸位置的高度差(如圖所示)，根據(jù)此數(shù)值設(shè)置板型，使其可自動(dòng)識(shí)別不同孔，并自動(dòng)聚焦。
實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)流程圖和種板設(shè)計(jì)如圖所示，HepG2細(xì) 胞 或 熒 光 素 被 種 在 每 個(gè) 孔 中 ， 用Hoechst染全部細(xì)胞核，CellTox Green染凋亡細(xì)胞。藥物孔中的Aflatoxin B或培養(yǎng)基和熒光素每天更換三次，連續(xù)培養(yǎng)
及拍攝四天。四天中，含藥物或不含藥物的培養(yǎng)基持續(xù)增加濃度并更新，在孔間產(chǎn)生連續(xù)的濃度梯度差，通過高內(nèi)涵的圖像分析功能，得到熒光變化曲線。本文通過評(píng)價(jià)Aflatoxin B對(duì)肝細(xì)胞的影響，測評(píng)流體培養(yǎng)系統(tǒng)和高內(nèi)涵成像分
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