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在酶標儀上利用 KASP 基因分型技術檢測 SNPs

閱讀:168      發(fā)布時間:2021-06-29
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基因分型是一種在不同個體間檢測他們的DNA 序列以分析遺傳差異的過程。用于基因分型的方法很多,使得研究人員有能力研究人類、微生物和植物中的基因多樣性。 單核苷酸多態(tài)性 (SNPs) 是其中一種最為普遍的遺傳變異類型,包括某個特定位點的單核苷酸突變。SNP 基因分型已經(jīng)被證實在識別許多物種的疾病相關突變中非常有用,因此也已開發(fā)出很多針對 SNP 檢測的技術1。

Kompetitive 等位基因特異性 PCR 因其高準確性、高性價比并在分析設計方面的高度靈活性而成為一種最為廣泛使用的 SNP 基因分型技術。KASP使用兩條等位基因特異的正向引物和一條通用反向引物,通過聚合酶鏈式反應 (PCR) 擴增目標 DNA 序列,與其序列相對應的反應產(chǎn)物則被標記上熒光染料。如果一個樣品是純合子,PCR 產(chǎn)物將只會被 HEX或 FAM 熒光染料標記,但如果是雜合體,則會出現(xiàn)被 HEX 和 FAM 同時標記的產(chǎn)物。未參與標記的熒光染料會被淬滅2,3。KASP 可在微孔板中進行操作,并且可使用熒光微孔讀板機進行檢測。
 

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美谷分子儀器(上海)有限公司

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