BCA 法是一種通過(guò)比色分析來(lái)對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行定量的方法。該方法利用蛋白在堿性環(huán)境中將 Cu2+ 還原成 Cu+，BCA 與 Cu+ 形成有顏色的絡(luò)合物。該水溶液絡(luò)合物在特定波長(zhǎng)下有強(qiáng)烈的吸光值，且在一定范圍內(nèi)蛋白濃度與光吸收值成正比，這就使得我們可以利用微孔板讀板機(jī)進(jìn)行高通量、高靈敏度的蛋白定量檢測(cè)。早期的 PierceTMBCA 蛋白檢測(cè)試劑盒需要 37℃ 孵育 30 分鐘，在 562 nm 處檢測(cè)光吸收變化。
新版Pierce Rapid Gold BCA 蛋白檢測(cè)試劑盒僅需室溫孵育 5 分鐘就會(huì)產(chǎn)生強(qiáng)烈的橙-金絡(luò)合物，在 480 nm 處檢測(cè)。SpectraMax iD5 多功能微孔板讀板機(jī)具有光吸收檢測(cè)功能，可以進(jìn)行蛋白定量
檢 測(cè) 。 下 面 ， 我 們 介 紹 一 下 如 何 用SpectraMax iD5 配套 SoftMax®Pro 軟件，用 Pierce BCA 蛋白檢測(cè)試劑盒和 PierceRapid Gold BCA 蛋白檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)。以上試劑盒均包括標(biāo)準(zhǔn)品牛血清白蛋白，SoftMax Pro 預(yù)設(shè)的模板可以根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線將待測(cè)蛋白的濃度自動(dòng)計(jì)算出來(lái)。Pierce Rapid Gold BCA 蛋白檢測(cè)試劑盒僅需室溫孵育 5 分鐘相比 Pierce BCA 試劑盒 37℃ 孵育 30 分鐘，可節(jié)省大量時(shí)間且提高操作簡(jiǎn)便性。
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