Gq 蛋白偶聯(lián)受體激活過程通常借助于具有熒光功能的微孔板讀板機(jī)來實(shí)時(shí)監(jiān)測鈣敏感的熒光染料與細(xì)胞內(nèi)鈣離子的結(jié)合來實(shí)現(xiàn)。通常我們會(huì)通過微孔板讀板機(jī)內(nèi)的自動(dòng)移液裝置將激動(dòng)劑化合物加到預(yù)鋪細(xì)胞的孔板中，然后讀板機(jī)檢測系統(tǒng)實(shí)時(shí)監(jiān)測化合物引起的熒光強(qiáng)度值的變化，對(duì)動(dòng)力學(xué)檢測結(jié)果進(jìn)行分析，可以得到關(guān)于化合物響應(yīng)曲線的一些信息，其中包括激動(dòng)劑和拮抗劑的 EC50 和 IC50 值。
在本篇應(yīng)用文獻(xiàn)中，我們介紹了如何利用配有注射器模塊的 SpectraMax®i3x 多功能微孔板讀板機(jī)來對(duì)兩種不同的細(xì)胞系進(jìn)行鈣離子濃度測定。CHO M 1 WT 3 是采用中國倉鼠卵巢細(xì)胞穩(wěn)定轉(zhuǎn)染 M 1 毒蕈堿的 Gq 受體細(xì)胞，1321N 1 是人星形細(xì)胞瘤細(xì)胞系具有內(nèi)源性毒蕈堿膽堿能受體，借助于 SoftMax®Pro 軟件的數(shù)據(jù)分析功能精確獲得兩個(gè)細(xì)胞系的EC50 和 IC50 值，我們與以前使用高通量篩選系統(tǒng)獲得的結(jié)果進(jìn)行比較。在軟件的Acquisition Editor 界面下，流程化界面方便我們?cè)O(shè)置注入器的相應(yīng)參數(shù) ( 圖 1 所示 )。
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