Molecular Devices 的 IMAP® 技術(shù)能對激酶,磷酸酶和磷酸二酯酶進(jìn)行快速,均質(zhì)和非放射性的分析,非常適用于分析開發(fā)和高通量篩選。IMAP 檢測是基于磷酸基團(tuán)與固定在納米微粒表面的三價(jià)金屬陽離子之間的高親和力結(jié)合??梢允褂?FP 與TR - FRET 兩種讀數(shù)方法來檢測磷酸化底物與納米微粒相互的結(jié)合情況。在 FP 方法中,當(dāng) IMAP 結(jié)合溶液與磷酸化底物結(jié)合時(shí),肽的分子運(yùn)動被改變,引起標(biāo)記在肽上的熒光分子的熒光偏振效應(yīng) (FP) 增加( 圖 1,左 )。在 TR - FRET 方法中,當(dāng)存在磷酸化的熒光底物時(shí),鋱 (Tb) 供體能夠與底物熒光受體發(fā)生熒光能量轉(zhuǎn)移 ( 圖 1,右 )。該方法使用時(shí)間分辨熒光 (TRF) 檢測模式,能夠消除了測定組分或篩選中化合物的熒光干擾,并且底物尺寸和濃度的選擇更靈活。
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